小鼠胚胎干細(xì)胞系MESPU30 elisa試劑盒技術(shù)原理:
1、抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
2、結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
3、 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
4、 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
5、此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
6、加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。
試劑盒小貼士
1. 在收到試劑盒后,為保證檢測(cè)效果,需要根據(jù)說(shuō)明書(shū)中保存條件正確儲(chǔ)存。除非特別注明,試劑盒大多是在2~8°C條件下儲(chǔ)存
2. 在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,請(qǐng)確認(rèn)包裝中的試劑盒成分與說(shuō)明書(shū)一致,再進(jìn)行后續(xù)操作
3. 溶解標(biāo)準(zhǔn)品過(guò)程中,注意標(biāo)準(zhǔn)品是否受潮,過(guò)程中要避免產(chǎn)生泡沫
4. 為了避免交叉污染,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽
5. 每次孵育時(shí),正確使用封板膠紙可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性
6. 正確洗板有助于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性
7. TMB顯色底物在上板前應(yīng)為無(wú)色,請(qǐng)避光保存。加入孔板后,將由無(wú)色變成不同程度的藍(lán)色
8. 終止液上板順序需與底物上板順序一致,加入終止液,溶液顏色由藍(lán)色變?yōu)?。如果出現(xiàn)綠色,即表明終止液與底物未混勻,請(qǐng)充分混合