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實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

桿菌(YP)*試劑盒 48T  3β-Hydroxyergost-5-en-7-one  156767-69-0 中文名： 分子式：C28H46O2

噬中性及細(xì)胞活化肽 -2(NAP-2) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 Testosterone isocaproate 中文名：異己酸 分子式：C25H38O3

病毒H7亞型PCR檢測試劑盒 （熒光PCR法）噬酸性粒細(xì)胞趨化因子 -2(Eotaxin-2) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol  3090-70-8 中文名：3-乙?；?span>-5α-雄烷二醇 分子式：C21H34O3 度：98.0%

嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白 英文名稱： eosinophil cationic protein 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： ECP  3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  14858-07-2 中文名： 分子式：C28H44O3 度：97.0% 關(guān)鍵詞： 靈芝; 麥角甾烷; 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子 (Eotaxin) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 Biosource  3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  88191-14-4 中文名： 分子式：C28H44O4 度：97.0% 關(guān)鍵詞： 靈芝; 麥角甾烷; 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
DKK1 Others Human  DKK1 / Dkk-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 黃芪甲苷質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAstragaloside IV

EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0902那格列奈（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Nateglinide

KLRB1A Others Mouse 小鼠 NKR-P1A / Klrb1a 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 帕米1酸二鈉質(zhì)量規(guī)格：>99%,五水合物Pamidronate Di

H125 細(xì)胞帕米1酸二鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Pamidronate Di

DLD-1結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞 DLD-1 human colorectal cancer cell line 1640+10% FBS硫酸慶大霉素質(zhì)量規(guī)格：>590IU/MG,BRGentamicin sulfate
BMPR2 Others Human  BMPR-II 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 反式玉米素trans-Zeatin質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞總RNAHBdSF NA氯亞鉑酸鉀 Dipotassium tetrachloroplatinate質(zhì)量規(guī)格：BR,鉑含量 ≥46%,原始鉑粉度＞99.95%

ATF2 Others Human  ATF2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 環(huán)黃芪醇Cycloastragenol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17馬兜鈴酸AAristolochic acid A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

QGY-7703細(xì)胞，細(xì)胞 表皮癌細(xì)胞系,A431細(xì)胞 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞;M5076羥基茜草素/紅紫素（標(biāo)準(zhǔn)品）Purpurin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
Marsdenoside F  中文名： 分子式：C39H60O14 度：% 兔固（ALD）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  中文名： 分子式：C28H40O3 度：% 兔去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Schleicheol 1  中文名： 分子式：C30H52O2 度：% 兔去甲上腺素elisa試劑盒 兔去甲上腺素試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔去甲上腺素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔去甲上腺素試劑盒、兔去甲上腺素elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。

Uzarigenin digitaloside  中文名： 分子式：C30H46O8 度：97.5% 兔素F2aelisa試劑盒 兔素F2a試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔素F2a試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔素F2a試劑盒、兔素F2a elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。

Daturametelin I  中文名： 分子式：C34H48O10 度：93.0% 兔素E2elisa試劑盒 兔素E2試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔素E2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔素E2試劑盒、兔素E2 elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。