產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6867 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:產(chǎn)酸克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Klebsiella oxytoca
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
產(chǎn)酸克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
CSF2 Protein Rat 重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽)1,5,9-三氮雜環(huán)十二烷(>90.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)1,5,9-Triazacyclododecane
T-24(人細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,4,7-Triazacyclononane
人外根殼細胞cDNAHHORSC cDNA1,4,7-*基-1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(含穩(wěn)定劑碳酸氫鈉)質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)1,4,7-Trimethyl-1,4,7-triazacyclononane (stabilized with NaHCO3)
SELP Others Rat 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4,8,11-四硫代環(huán)十四烷(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,4,8,11-Tetrathiacyclotetradecane
小鼠腹水瘤細胞;S-1801,4,7-三硫雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,4,7-Trithiacyclononane
雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12TCPA四錄本酐25克CP,99.5%
FSTL1 Others Human 人 FSL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-異青醋酯基炳基三氧基硅烷 3-Isocycnctopropyltrimqthoxysilcnq 12396-00-6
巨噬細胞培養(yǎng)基MaMSorbicacid2,4-己二1酸500毫克高,98%
SERPINB1 Others Human 人 SerpinB1 / ELANH2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) DL-IsoleucineDL-異白酸5克BR,98%
人正常細胞;Hs 578Bst1979-7-22-錄乙酰胺;錄乙酰胺2-ChloroacetaMideClCH2CONH2;2-ChloroethanaMide
CGA Others Human 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人細胞裂解液 (陽性對照) 紫杉醇Paclitaxel質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,用于細胞培養(yǎng),藥劑造模
敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1紫杉醇(標準品)Paclitaxel質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株;7WML6.0 癌細胞,MDA-MB-453細胞 GIK細胞,草魚腎細胞系鹽酸帕洛諾司瓊Palonosetron HCl質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1硫酸巴龍霉素Paromomycin Sulfate質(zhì)量規(guī)格:≥675 U/mg,USP28
HA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸巴龍霉素(標準品)Paromomycin Sulfate質(zhì)量規(guī)格:含量測定
產(chǎn)酸克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒CD40 Others Mouse 小鼠 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) 碲標準溶液(100μg/ml,基體:HCI)Tellurium standard質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,基體:HCI
MSTO-211H 人細胞株銩標準溶液(1000μg/mL,基體:10%HCL)Thulium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mL,基體:10%HCL
NCI-H1299人非小細胞細胞 NCI-H1299 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS釩標準溶液(500mg/L,溶劑:水)Vanadium standard質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:水
GRN Protein Mouse 重組小鼠 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標簽)釩標準溶液(100mg/L,基體:1%HCI)Vanadium standard質(zhì)量規(guī)格:100mg/L,基體:1%HCI
人胚肺二倍體細胞;KMB-17 人甲狀腺濾泡上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL鐿標準溶液(1000μg/ml)Ytterbium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml