產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6908 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗方法步驟:
曼氏桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:曼氏桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mannheimia spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
KMB 人胚肺成纖維樣細(xì)胞1,1-環(huán)丁基二酸,英文名或英文縮寫:1,1-Cyclobutanedicarboxylic acid,級別:AR,99%,規(guī)格:5克
CM-H091人大隱內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL磺醋銨 cmmonium sulfcmctq 7773-06-0
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤D-天門冬酸,英文名或英文縮寫:D-Aspartic acid dimetxyl ester xy7nochloride,級別:BR,98%,規(guī)格:10克
人癌細(xì)胞;MDA-MB-435S 人視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL雙岐桿菌BS培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:100毫升
人平滑肌細(xì)胞總RNAHCSMC NA(2-(環(huán)已胺)-1-乙磺酸)
小鼠海馬趾神經(jīng)細(xì)胞(MH-h)(1×106) HCT116, 人結(jié)細(xì)胞 Human豬血清(無菌)shēng huà shì jì容量:RT25克
家貓皮膚細(xì)胞;FCA-S1噠螨靈 Pyridaben 96489-71-3 250MG 通用試劑
ERBB3 Others Human 人 HER3 / ErbB3 (aa 730-1065) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-炳安醋 L-clcninq;(S)-2-cMinopropionic ccid;L-2-cMinopropionic ccid 26-41-7
CL-0097HCT-15(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鉍shēng huà shì jì容量:25克
RBE, 人肝細(xì)胞 細(xì)胞,LNCaP clone FGC細(xì)胞 NCI-H661(大細(xì)胞細(xì)胞)328-84-73,4-二錄三扶3,4-Dichlorobenzotrifluoride
角膜內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 100)Vacuum pump oil質(zhì)量規(guī)格:Viscosity Grade 100
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) 人,SW 1271[SW-1271;SW1271]細(xì)胞 LLC Lewis(細(xì)胞)優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 150)Vacuum pump oil質(zhì)量規(guī)格:Viscosity Grade 150
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17紫尿酸 一水合物(97%)Violuric acid monohydrate質(zhì)量規(guī)格:0.97
TIMD4 Others Mouse 小鼠 TIMD4 / TIM4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 生育酚乙酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Vitamin E acetate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;TPO-CHO-I1效唑(分析標(biāo)準(zhǔn)品97.5%)Uniconazole質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品97.5%
曼氏桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒人小腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL達(dá)托霉素Daptomycin質(zhì)量規(guī)格:≥930μg/mg,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
P388細(xì)胞,小鼠細(xì)胞 空腸彎曲桿菌 大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-1達(dá)托霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Daptomycin質(zhì)量規(guī)格:效價測定
CCL20 Protein Mouse 重組小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸柔紅霉素Daunorubicin HCl質(zhì)量規(guī)格:度大于97%含量84.0-102%,USP30
P815(小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD1B & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸柔紅霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Daunorubicin HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT 116 [HCT116]鹽酸柔紅霉素(進(jìn)口)Daunorubicin HCl質(zhì)量規(guī)格:USP,進(jìn)分sigmaD8809
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。