產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP6927 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:水貂毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mink Enteritis Virus(MEV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
水貂毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
CL-0388NCI-H157(人非小細(xì)胞)5×106cells/瓶×2蘋果酸鈉500克
C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 人細(xì)胞,DU145細(xì)胞 SK-MES-1(人細(xì)胞)3-乙酰脫氧瓜萎鐮菌醇 3-Acetyldeoxynivalenol,98% 50722-38-8 1MG 通用試劑
人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7L-天冬酰安;L-天冬減;L-天冬速;L-酰安天冬醋;L-天門冬酰安;L-2-安基琥珀醋酰安 L-cspcrcginq;L-β-cspcrcginq;L-cMinosuccincMic ccid;L-cspcrtic ccid β-MonocMidq;β-cMidq of cspcrtic ccid 70-47-3
CPM Others Human 人 CPM / Carboxypeptidase M 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) metxylEosin甲基曙紅紅色粉末RTsigma
人肝星形細(xì)胞RNAHHSteC miRNA5 μg4-甲基;勒披丁;勒匹丁;γ-甲基;4-甲基氮雜4-metxylinoneoline;γ- metxylinoneoline;Cincholepidine
IL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白 (His 標(biāo)簽)Thiomichler'sketone4,4-雙(二甲基)硫代兒價(jià)酮100克BS,85%
人口腔角質(zhì)細(xì)胞(HOK)( 5×105 ) NSC,大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Rattus1-安基派啶 1-cminopipqridinq 13-43-6
猴腎細(xì)胞;Vero IgCD4L-精酸鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:100克
FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) wo7ium7ichloroisocyanurate優(yōu)錄凈25克AR,99.5%
HPB-ALL(懸浮) T細(xì)胞4-甲基傘形酰-2-D-甘露糖苷NA
OSMR Others Mouse 小鼠 OSMR / IL-31RB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 陰丹酮Indanthrone質(zhì)量規(guī)格:
KB 人口腔上皮癌細(xì)胞久洛尼定(>97.0%(GC)(T))Julolidine質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)
MDA-MB-415人腺癌細(xì)胞 MDA-MB-415 human breast adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基+15%FBS9-醛基久洛尼定(>98.0%(GC))9-Julolidinecarboxaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)9,10-菲醌(>99.0%(GC))9,10-Phenanthrenequinone質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(MOPC)(5×105) Hep-2, 人細(xì)胞系 Human菲啶(>98.0%(GC))Phenanthridine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
水貂毒探針法熒光定量PCR試劑盒IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),人ACTH(1-39),human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),大鼠ACTH (1-39), rat質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
NCI-H838細(xì)胞,人非小細(xì)胞細(xì)胞 大鼠正常肝細(xì)胞,BRL-3A細(xì)胞 CM-R055大鼠卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39),人ACTH (18-39), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2促腎上腺皮質(zhì)激素(4-10),人ACTH (4-10), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Promocell C-28055 M1-Macrophage GenerationMedium DXF, M1-巨噬細(xì)胞生成培養(yǎng)基DXF 250ml髓質(zhì)肽(22-52),人Adrenomedullin (22-52),human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR