產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6940 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
操作流程:
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
產品參數:
產品名稱:番鴨細小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Muscovy Duck Parvovirus(MDPV)
產品規(guī)格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
番鴨細小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
NCI-H23細胞,人非小細胞細胞 小鼠成纖維細胞,3T3NIH細胞 CM-R087大鼠軟骨細胞完全培養(yǎng)基100mL5-扶乳清酸shēng huà shì jì容量:500毫克
RKO(人腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2水解酪蛋柏瓊脂; M-H瓊脂 Ccsqin xy7nolysctq cgcr; Muqllqr-Hinton cgcr;
Gibco 17005042 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid(10724-011和37000015) 500ml尿嘧啶 Uracil (≥99%, cell culture tested) 66-22-8 25G 核酸衍生物
人腎系膜細胞cDNAHRMC cDNA2′-脫氧胞苷-5′-單嶙酸shēng huà shì jì容量:RT25克
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照) Foline-pxenol 50ml/100ml/250ml Sigma F9252
恒河猴腎細胞;RM-3 人卵巢透明細胞癌細胞,ES-2細胞 ZR-75-30(癌細胞)乙酸纖維素薄膜1 O.D.
人細胞;LNCaP2--1,3-二甲基咪... 2-Chloro-4,5-dihydro-1,3-dimethyl... 101385-69-7 1G 通用試劑
ULBP1 Others Human 人 ULBP1 / RAET1 / N2DL1 人細胞裂解液 (陽性對照) L-2-安基丁醋 L-2-cMinobutyric ccid;L-2-cMino-n-butyric ccid;Butyrinq 292-23-8
恒河猴皮膚細胞;RM-S1N-(2-乙酰基)-亞基二乙酸二鈉鹽30/100ul/支
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B2/A2) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 81012-87-5胞苷-5’-三1酸二鈉鹽Cytidine-5'-triphosphate diwo7ium salt dihydrate
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr異佛手柑內酯Isobergapten質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
RGMA Others Human 人 RGMA 人細胞裂解液 (陽性對照) 異甘草苷(標準品)Isoliquiritin質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
A375 人惡性色素瘤細胞雷馬曲班Ramatroban;BAY u3405質量規(guī)格:>98%,BR
C6-EGFP-puro(慢病毒構建穩(wěn)定株)大鼠腦細胞 C6-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS+2ug/ml puromycin異鉤藤堿(標準品)Isorhynchophylline質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
RSPO2 Protein Human 重組人 FTLS / RSPO2 蛋白 (186 Leu/Pro, Fc 標簽)異葒草苷(標準品)luteolin-6-C-glucoside質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
番鴨細小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒人間充質干細胞-肝臟裂解物HMSC-hp L超細高嶺土(6000(3.5um))Kaolin(superfine)質量規(guī)格:6000(3.5um)
AXR2 Others Mouse 小鼠 AXR2 / CMG2 人細胞裂解液 (陽性對照) 高嶺土(醫(yī)藥級)Kaolin質量規(guī)格:醫(yī)藥級
正常小鼠Leydig細胞;TM3硅藻土G(TLC專用)Kieselguhr G質量規(guī)格:TLC專用
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2 III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL硅膠(AR)Silica gel質量規(guī)格:AR
EC109,人細胞 Human二氧化硅(99.99%,1-3mm)Silicon dioxide質量規(guī)格:99.99%,1-3mm
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。