產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP6951 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱(chēng):偶發(fā)分枝桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱(chēng):Mycobacterium fortuitum
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
偶發(fā)分枝桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
人成纖維細(xì)胞總RNAHLF NA本亞磺酸鈉5毫克
CD79B Others Rat 大鼠 CD79B / B29 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2,3-二溴炳醇 2,3-Dibromo-1-propcnol 96-13-9
人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL十二醇25克
VERO C1008 (E6)細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞 CHO/dhFr-(中國(guó)倉(cāng)鼠二氫葉酸還原酶缺陷細(xì)胞) 小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA抗生素Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基25克
EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)4298-52-62-乙炔2-Ethynylthiopxene
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽)酸性嶙酸酶測(cè)試盒500支/包
M-NFS-60 (小鼠細(xì)胞G-CSF依賴(lài)性) 5×106cells/瓶×2 腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)哌拉西林 Piperacillin 61477-96-1 5G 通用試劑
人Butt瘤細(xì)胞;RAJI過(guò)氧化輕30%(*);二氧化輕;二氧化二輕 xy7nogqn Pqroxidq Concqntrctq 77-84-1
DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D-MANNITOLD-甘露醇美國(guó)藥典級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma
人胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL108-30-5琥珀1;丁二1;琥珀酐;2,5-四氫呋二酮Succinicanhydride ;Succinic acid anhydride;Succinyl oxide;2,5-Diketotetraxy7nofuran;Dixy7no-2,5-furandione;Bernsteinsaure anhydride
ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 乙酸銨(分子生物學(xué)級(jí))Ammonium acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)
KG-1 人髓性紅細(xì)胞微晶纖維素(100 um)Cellulose, Microcrystalline質(zhì)量規(guī)格:BR,100 um
HeLa 229人細(xì)胞 HeLa 229 human cervical cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS乳糖;α-乳糖,一水alpha-Lactose, monohydrate質(zhì)量規(guī)格:BR
HGF Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白氯化鈣二水Calcium chloride, dihydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(MPNF)(5×105) HL-60, 人早幼粒細(xì)胞 Human乙二醇Ethylene glycol質(zhì)量規(guī)格:BR
偶發(fā)分枝桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 布地奈德-d8Budesonide-d8質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
EJ 人細(xì)胞6α-羥基布地奈德6α-Hydroxy Budesonide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
SW1116人腺癌細(xì)胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS6β-羥基布地奈德6β-Hydroxy Budesonide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)亞葉酸鈣水合物Folinic acid calcium salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人癌細(xì)胞 Human喜樹(shù)堿鈉鹽 Camptothecin質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口