產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6944 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:禽結(jié)核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycobacterium avian
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
禽結(jié)核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3PROTEINASEK,20MG/MLSOLUTION蛋白酶K,20mg/ml溶液生物技術(shù)級5MLCOLD
JF-305細(xì)胞,人細(xì)胞 人細(xì)胞系,HS-1細(xì)胞 KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422本達(dá) Bqntczonq 2027-89-0
HuH-7(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Cytidine胞嘧啶核苷7.5KUBR,98%
Promocell C-22011 Endothelial Cell GrowthMedium 2, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型(即用) 500mlKANAMYCIN50MG/ML卡那霉素溶液超級20MLFrozen
人肺動脈成纖維細(xì)胞裂解物HPAFL(二甲基價(jià)酰按)
大鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(RPNF)(5×105) HEC-1A, 人細(xì)胞系 Human氧化亞銅shēng huà shì jì容量:500克
恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]4,5-二基咪唑 4,5-oimidazole,99.0% 1122-28-7 5G 通用試劑
CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-鳥安醋言醋鹽 L(+)-Ornithinq xy7nochloridq 3184-13-
CL-0221SVEC4-10(小鼠結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2ACRYL/BIS37.5:1;40%SOLUTION酰胺/甲叉 37.5:1, 40%溶液蛋白組學(xué)級500MLCOLD
J-111細(xì)胞,單核細(xì)胞細(xì)胞 人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞,CGM1細(xì)胞 人細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229]102-79-4正丁基二2,2'-(Butylimino)diethanol
CL-0067COLO 320(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2乙酰水楊酸-d4Acetylsalicylic Acid-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3 大鼠牙細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLDL-賴氨酸乙酰水楊酸(賴氨匹林)DL-Lysine Acetylsalicylate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
LOVO/Adr 阿霉素耐藥株?;阴K畻钏?/span>-β-D-葡萄糖苷酸Acetylsalicylic Acid Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
EML1 Others Human 人 EML1 / TLT-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酰水楊酸1Acetylsalicylic Anhydride質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36脫氫鹽酸尼卡地平Dehydro Nicardipine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
禽結(jié)核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒HEPG2.2.15 細(xì)胞HBV病毒株草酰乙酸Oxaloacetic acid質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
CL-0290MDA-MB-468(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硫酸鋅七水(AR)Zinc sulfate, heptahydrate質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,AR
RLF, 大鼠成纖維細(xì)胞1酸鉀鈉四水Potassium tatrate, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7 人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL縮二脲Biuret質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHA-sp NA硫酸鎂無水(分子生物學(xué)級)Magnesium sulfate anhydrous質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。