產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6958 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:副結(jié)核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycobacterium paratuberculosis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
副結(jié)核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
HBL-100細胞,整合SV40基因的上皮細胞 人結(jié)直腸腺癌細胞,HCT-15細胞 CM-R021大鼠胰腺上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL錄化鑭1克
大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5腸激酶 Enterokinase from bovine intestine 9014-74-8 10UN 通用試劑
FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人細胞裂解液 (陽性對照) 異務全;3-基丁全;異纈草全 Isovclqrcldqhydq;3-Mqthylbutyrcldqhydq;Isovclqric cldqhydq;3-Mqthyl butcncl 290-86-3
人臍動脈內(nèi)皮細胞cDNAHUAEC cDNA5-肌苷一嶙酸二鈉鹽shēng huà shì jì容量:1克
ACPP Others Human 人 ACPP / PSAP 人細胞裂解液 (陽性對照) 503-66-23-羥基酸(含數(shù)量不等3,3’-氧化二酸)3-xy7noXYPROPIONIC ACID
FO細胞,細胞 人胚肝二倍體細胞,CCC-HEL-1細胞 CL-0208SH-SY5Y(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2低分子MARK,英文名或英文縮寫:SDS-PAGE Molecular low weight markers for proteins,級別:BR,2u/mg,規(guī)格:25克
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-肌醋 Crqctinq monohydrctq 600-87-7
LAMP3 Others Human 人 CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 人細胞裂解液 (陽性對照) dGTP,TRIwo7iumSALT,DIHYDRATE dGTP, Na3, 2H2O超級白色精細結(jié)晶粉末FROZENsigma
內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)6-PG-BaD-葡萄糖-6嶙酸鋇鹽10KU高,99%
TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) (2,4-二錄本氧乙酸)
脂肪細胞培養(yǎng)基AdM胰凝乳蛋白酶原 AChymotrypsinogen A質(zhì)量規(guī)格:酶活:>1500 U/mg,BC
CLEC1A Others Rat 大鼠 CLEC1A / CLEC-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 汽巴藍Cibacron blue 3G-A質(zhì)量規(guī)格:ACS Grade
大鼠胰島細胞完全培養(yǎng)基 100mLDEAE葡聚糖DEAE Dextran質(zhì)量規(guī)格:BR
MLE-12小鼠肺上皮細胞株 MLE-12 mouse lung epithelial cell lines DMEM/F12+2%FBS氟啶酮(>98%,植物激素級)Fluridone質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物激素級
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標簽)組胺(>98%,BC)Histamine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
副結(jié)核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒人滑膜細胞RNAHS miRNA5 μg丙谷胺(標準品)Proglumide質(zhì)量規(guī)格:含量測定
LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) GW501516GW501516(GSK-516; GW1516)質(zhì)量規(guī)格:>98%,高度選擇性的PPARβ/δ激動劑
牛胚氣管細胞;EB (NBL-4)布洛芬(標準品)Ibuprofen質(zhì)量規(guī)格:含量測定
A172細胞,膠質(zhì)母細胞瘤細胞 ,HepG2細胞 人結(jié)直腸腺癌細胞;COLO 205比沙可啶(標準品)Bisacodyl質(zhì)量規(guī)格:含量測定
小鼠瘤株;S180醋酸氯己定(標準品)Chlorhexidine Acatate質(zhì)量規(guī)格:含量測定