產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6960 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycobacterium scrofulaceum
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
C2C12, 小鼠肌原細胞酸鋇shēng huà shì jì容量:RT500毫升
RSC, 大鼠雪旺細胞 NCYC 234[IPAZSC 148]細胞 COS-7(SV40 轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞)姆沙伯 W AW ChroMosorb W cW;
人細胞;CNE-2Z重蒸酚 () Phenol 108-95-2 250ML 通用試劑
DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氫-鉀ATP酶測試盒50支/包RT
人導(dǎo)管癌細胞;ZR-75-1(DNA高分子量標準)
GLYCOPROTEIN Others Sudan ebolavirus 蘇丹病毒 Glycoprotein / GP 人細胞裂解液 (陽性對照) YGC瓊脂shēng huà shì jì容量:2~8℃25毫升
人肺巨細胞癌低轉(zhuǎn)移細胞株;PG-LH72(5H)-同 98% 2(5 H)-THIOPHqNONq 3324/3/3
敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1 貓腎細胞,CRFK細胞 Cyc-Tag(S49)細胞,小鼠T細胞瘤細胞硫柳鈉shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克
人胚;HFL-I刃天青shēng huà shì jì容量:100克
CRP Others Mouse 小鼠 CRP / PTX1 人細胞裂解液 (陽性對照) PonceauS 10g/25g/100ml Amresco分裝
C2C12, 小鼠肌原細胞胰多肽,大鼠Pancreatic Polypeptide, rat質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞(傣族);KM9403 人臍動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL甲狀旁腺激素(1-38),人Parathyroid Hormone (1-38),human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
上皮細胞生長添加物BEpiCGS五肽胃泌素Pentagastrin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液 (陽性對照) 肽YY,人Peptide YY, Human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人癌細胞;MCF7肽YY,犬,大鼠,小鼠,豬Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒FGF9 Protein Canine 重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標簽)丙泊酚葡萄糖苷酸Propofol Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
A3(人T細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml4-羥基丙泊酚4-Hydroxy Propofol質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人滑膜細胞cDNAHS cDNA2,2-二甲基-4-異丙基-1,3-苯并二茂2,2-Dimethyl-4-isopropyl-1,3-benzodioxole質(zhì)量規(guī)格:美國進口
TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-羥基丙泊酚4-O-β-D-葡萄糖苷酸4-Hydroxy Propofol 4-O-β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人內(nèi)臟脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mL4-羥基丙泊酚1-O-β-D-葡萄糖苷酸4-Hydroxy Propofol 1-O-β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口