產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP6961 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:猿分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycobacterium simiae
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
猿分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Human(+/-)-氯前列醇鈉鹽水合物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口(+/-)-Cloprostenol salt hydrate
TNFRSF14 Others Human 人 TNFRSF14 / HVEA / HVEM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (+)-氯前列醇質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口(+)-Cloprostenol
人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞HRGEC頭孢氨芐水合物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Cephalexin Hydrate
HA Others H10N9 甲型 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2,2-二羥基聯(lián)本25克
大鼠小腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLTAPSO 10g/100g原裝 Sigma T9269
骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鳥嘌呤鹽酸鹽100克
FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6-羌基-2,5,7,8-四基本并二輕-2-羧醋 6-xy7noXY-2,5,7,8-TqTRcMqTHYLCHROMcN-2-CcRBOXYLIC cCID 23188-07-1
Rat Asocytes 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞AGAROSEITAETS,500MG瓊脂糖Ⅰ型,超級(jí)1000 TAETSRT
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;R 1610 [R1610]溴紫10ku保存:-20℃
DU 145, 人細(xì)胞(布里杰-35)
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6 巨核細(xì)胞細(xì)胞,Dami細(xì)胞 NR8383細(xì)胞,大鼠肺泡巨噬細(xì)胞樣生長(zhǎng)因子I(57-70)Insulin-like Growth Factor I (57-70)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
HEC-1A, 人細(xì)胞系 Human樣生長(zhǎng)因子Ⅱ(69-84)Insulin-Like Growth Factor II(69-84)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CDH5 Others Human 人 CDH5 / Cadherin-5 / CD144 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 白介素-1β轉(zhuǎn)化酶底物Interleukin-1β Convertase Substrate質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
上皮細(xì)胞培養(yǎng)基BEpiCM-prf下鈣素Katacalcin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
LYVE1 Others Mouse 小鼠 LYVE1 / LYVE-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 肯普肽Kemptide質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
猿分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒RLE-6TN細(xì)胞,大鼠肺上皮Ⅱ型細(xì)胞 PC-3(人細(xì)胞) 大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A別隱品堿;A-別隱品堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Allocryptopine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)LGD-4033 LGD4033 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
16HBE(人上皮樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH35-溴嘧啶5-Bromopyrimidine 質(zhì)量規(guī)格:>98%
人上皮細(xì)胞;Hep-2阿螺旋霉素17-DMAG質(zhì)量規(guī)格:HSP90 抑制劑,進(jìn)分
LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大豆異黃酮Soybean isoflavones質(zhì)量規(guī)格:染料木素17%-20%,異黃酮含量在40-50%
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。