產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6999 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產品參數(shù):
產品僅供科研使用產品名稱:奈瑟菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Neisseria spp.
產品規(guī)格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
奈瑟菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-甲氧基shēng huà shì jì容量:RT250克
人上皮細胞cDNAHPEpiC cDNA炳1晴(劇讀) ccrylonitnilq
SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) 5'-三1酸鳥苷 Guanosine 5′-triphosphate (GTP... 36051-31-7 10MG 核酸衍生物
大鼠源細胞150mm培養(yǎng)皿shēng huà shì jì容量:2~8℃50毫克
SMMC-7721細胞,人細胞 人退行性癌細胞,Calu-6細胞 大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5Freund'sCA 10ml Sigma原裝
IFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白PROTEINGELLOADINGBUFFER2X,WITHPYRONINY蛋白膠上樣緩沖液,2X 含派洛寧Y蛋白組學級橙粉紅色液體RTsigma
INS-1(大鼠胰島細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 脆弱擬桿菌BETA-BqTc-HCH 319-82-7
肺微內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)亞甲基藍 Methylene blue (Dye content, ≥82%) 7220-79-3 10G 染色劑
HAVCR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照) 四乙酰呋核糖,英文名或英文縮寫:1,2,3,5-Tetra-O-acetyl-β-D-ribofuranose,級別:,98%,規(guī)格:10毫升
人巨細胞細胞株;Mo7eL-Threonine 5g Sigma分裝
IFNA5 Others Rat 大鼠 IFNA5 / IFNaG 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸替羅非班(標準品)Tirofiban HCl質量規(guī)格:HPLC>99,標準品
人成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL普魯蘭糖;普魯蘭多糖Pullulan質量規(guī)格:Viscosity100-180 mPa-s;BR
Calu-6細胞,人退行性癌細胞 克雷伯桿菌 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21維生素 E, 生育酚Vitamin E,dl-α-tocopherol質量規(guī)格:>98%,油狀
CXCL12 Protein Canine 重組狗 CXCL12 / SDF-1 蛋白司他夫定Stavudine質量規(guī)格:>98,BR,可用于細胞培養(yǎng)
NCI-H1299(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 司他夫定(標準品)Stavudine質量規(guī)格:>98,標準品
奈瑟菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒Spike Others SARS SARS Spike S1 Subunit 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 胞1膽堿鈉;5-胞苷二1酸單鈉鹽Citicoline 質量規(guī)格:>98%,BR
小鼠細胞;L1210硬脂酸紅霉素Erythromycin stearate質量規(guī)格:USP
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3A1 中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL精胺Spermine質量規(guī)格:>98%,BR
U251人細胞 Human亞精胺Spermidine質量規(guī)格:>99%,進分
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照) 亞精胺1酸鹽Spermidine phosphate salt hexahydrate 質量規(guī)格:>98%(T),進口原裝