產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6959 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
操作流程:
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:海豹分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycobacterium pinnipedii
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
海豹分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人細胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ21α-溴異shēng huà shì jì容量:RT25克
人癌細胞;SK-BR-3葉綠速A(-20℃) CHLOROPHYLL c 479-61-8
CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / MAC-IP 人細胞裂解液 (陽性對照) 甘油 (分子生物級) Glycerol (for molecular biology, ≥99%) 56-81-5 100ML 通用試劑
MJ(懸浮) 瘤MiddleBrook7H11瓊脂shēng huà shì jì容量:RT,避光25克
95-D人高轉(zhuǎn)移細胞 Human high metastatic lung cancer cell line 95-D RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS(D-海藻糖)
人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]Fluridone1-甲基-3-本基-5-(3-三扶甲基本基)-4(1H)-酮150u高,95%
HBZY-1細胞,人腎小球髓母細胞 大鼠埀體瘤細胞,GH3細胞 CL-0210SiHa(人子宮頸鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2酚(異構(gòu)體混和物) Crqsol 1319-77-3
Vero(非洲綠猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2C.L.E.D培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:200張/盒
NHEM-c M2 adult 正常人表皮素細胞(NHEM)成年捐獻者(M2培養(yǎng)液中培養(yǎng)) 500,000cells 胎盤羊膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)ADPDIwo7ium7iHYDRATE 5'-二嶙酸腺苷二鈉超級白色結(jié)晶粉末FROZENsigma
骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3-基基氧硅烷NA
NCI-H460(人細胞) 5×106cells/瓶×2 腎動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)胰酶(1:4500)Pancreatin質(zhì)量規(guī)格:酶活1:4500,BR
支原體PCR檢測試劑盒MYCO枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君Orphenadrine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL12A & IL12B Others Human 人 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) β-半乳糖苷酶β-Galactosidase質(zhì)量規(guī)格:700u/mg,羅氏分裝
CatS2 家貓皮膚成纖維樣細胞脫落酸(標準品)Abscisic acid,S-ABA質(zhì)量規(guī)格:98%,標準品
CL-0070CRFK(貓腎細胞)5×106cells/瓶×2脫落酸(高)Abscisic acid,S-ABA質(zhì)量規(guī)格:98%,BR
海豹分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒CDH12 Others Human 人 CDH12 人細胞裂解液 (陽性對照) 丙二酸(AR)Malonate質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,AR
人滑膜細胞HS氯化錳四水Manganese (II) chloride, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%
EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細胞裂解液 (陽性對照) 干酪素Casein質(zhì)量規(guī)格:BR
大鼠肝動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL醫(yī)用凡士林Vaseline質(zhì)量規(guī)格:BR
HMy2.CIR人B母細胞 HMy2.CIR human B lymphoblastoid cell IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS原釩酸鈉 orthovanadate質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。