產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP6987 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:絲狀支原體山羊亞種探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycoplasma mycoidessubsp(capri)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
絲狀支原體山羊亞種探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
DU 145 人細(xì)胞乙酰乙酸1公斤
SW480 [SW-480]人腺癌細(xì)胞 SW480 [SW-480] human colon adenocarcinoma cells 1640+10% FBS三氧化二;氧化;綠 ChroMic oxidq;ChroMq grqqn;Grqqn cinncbcr;cncdonis grqqn;ChroMiuM(III)oxidq 1308-38-9
CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)1-基乙酸 1-acetic acid (≥95%, NAA) 86-87-3 25G 通用試劑
人羊膜上皮細(xì)胞(HAEpic)( 5×105 ) C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 Mouse霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基200張/盒RT
人癌細(xì)胞;MCF7(N'N二甲基酰胺)
MDA-MB-231, 人癌細(xì)胞wo7iumCHLORIDE錄化鈉ACS級,美國藥典級,歐洲藥典級白色精細(xì)顆粒粉末RTsigma
人細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826] 大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2′-脫氧鳥苷-5′-... 2′-Deoxyguanosine 5′-monophosphate d... 33430-61-4 250MG 通用試劑
肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)六亞基四安;海克三明;屋洛托品;;安仿;四氮六環(huán) HqxcMqthylqnqtqtrcMinq;Urotropinq;cccqlqrctor H;cMinoforM;cMMoforM;MqthqncMinq;CystcMin;Cystogqn;1,3,5,7-TqtrcczccdcMcntcnq 100-7-0
CN5 Others Mouse 小鼠 Coactin 5 / CN5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) wo7iumformate酸鈉鹽5克高,99%
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo對磺酰-L-精酸鹽酸鹽(見62022331)NA
IP6K1 Others Human 人 IHPK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 顏料綠 7Pigment Green 7質(zhì)量規(guī)格:
原代骨骼肌細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml酞菁(II)(>95.0%(T))Lead(II) Phthalocyanine質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 人肝上皮細(xì)胞,THLE-3細(xì)胞 EL4(瘤細(xì)胞)酞菁鋅(>95.0%(T))Zinc Phthalocyanine質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29酞菁鐵(II)(>95.0%(T))Iron(II) Phthalocyanine質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
TGFBR1 Others Human 人 TGFBR1 / ALK-5 / SKR4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酞菁二鈉Di Phthalocyanine質(zhì)量規(guī)格:
絲狀支原體山羊亞種探針法熒光定量PCR試劑盒BACE2 Others Mouse 小鼠 BACE2 / Beta secretase 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 苯硫(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC))Diphenyl sulfide質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)
人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4,4'-二氨基二苯(ODA)(標(biāo)準(zhǔn)品)4,4′-Diaminodiphenyl ether質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
S-180細(xì)胞,小鼠細(xì)胞 THP-1(單核細(xì)胞) 人細(xì)胞;C-33A二十二烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))Docosane質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
集落刺激因子4,4'-二氨基二苯硫(標(biāo)準(zhǔn)品)4,4'-Thiodianiline質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
SW579(人甲狀腺鱗癌細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2 甲型 H1N1 (A/USSR/90/1977) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 丙位十二內(nèi)酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC)) γ-Dodecalactone質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC)