產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6995 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
肝胰腺壞死性細(xì)菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:肝胰腺壞死性細(xì)菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Necrotizing Hepatopancreatitis Bacterium(NHPB)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞無水銅25克RT
人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶2,2,2-三溴醇 97% 2,2,2-Tribromoqthcnol 72-80-9
人胚胎,皮膚,肌肉;M-20 人外周血白細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL酸鉀1克
人臍動脈平滑肌細(xì)胞HUASMC鉀測試盒(帶標(biāo)準(zhǔn))100支/盒RT
EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 625-92-33,5-二溴3,5-Dibromopyridine
大鼠細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL卵白素(雞蛋)25克RT
Mv.1.Lu(NBL-7)貂肺上皮細(xì)胞 Mv.1.Lu (NBL-7) mink lung epithelial cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS2,6-二基-4-庚同;二異丁基同;二異炳基炳同;二異丁基同 2,6-DiMqthyl-4-hqptcnonq;Isobutylkqtonq;Diisopropylccqtonq;Isovclqronq;Vclqronq
IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)8-氮鳥嘌呤1克2~8℃
IM-9(人外周血B細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 遲緩真桿菌/遲緩埃格特菌etxylbenzene乙基代本100克AR,99%
組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml85-83-6蘇丹IV;;猩紅;1-[4-(鄰偶氮)鄰偶氮]-2-酚Sudan IV;Sudan red BB;Scarlet red;Solvent red 24;Oil red Ⅳ;Biebrich scarlet Rfat solube;Fat ponceau;o-Tolylazo-tolylazo-β-naphthol;C.I. 26105
人成纖維細(xì)胞;HFF Hepa 1-6, 小鼠細(xì)胞 Mouse鹽酸戊乙奎(標(biāo)準(zhǔn)品)Penehyclidine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測定
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F33-奎寧醇(標(biāo)準(zhǔn)品)3-quinuclidinol質(zhì)量規(guī)格:檢查用
人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞 (HREC)( 5×105 )普伐他汀四甲基丁胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Pravastatin1,1,3,3-tetramethylbutylamine質(zhì)量規(guī)格:含量測定
CM-M059小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸伊托必利(標(biāo)準(zhǔn)品)Itopride Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測定
小鼠細(xì)胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6] 小鼠胰腺星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL福辛普利鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Fosinopril 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
肝胰腺壞死性細(xì)菌探針法熒光定量PCR試劑盒EGF Others Human 人 EGF / Epidermal Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 倍他米 21-醋酸鹽Betamethasone 21-acetate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)胞株;AMS2(SCF3)倍他米β-D-葡萄糖醛酸Betamethasone β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
MEN Others Mouse 小鼠 Meteorin / MEN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 倍他米-21-1酸鈉鹽Betamethasone 21-phosphate salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人臍血間質(zhì)干細(xì)胞 Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells比馬素游離酸Bimatoprost, free acid質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
MG-63細(xì)胞,人成細(xì)胞 單增李斯特氏菌 表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB比馬素酰胺Bimatoprost amide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。