產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7003 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
微黃細(xì)頸線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:微黃細(xì)頸線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Nematodirus helvetianus
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
細(xì)胞名稱 種屬1克AR,99.5%
AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) [2-(基炳1酰氧)基]二基-(3-磺炳基)輕氧化銨 3-[Dimqthyl-[2-(2-mqthylprop-2-qnoyloxy)qthyl]czcniumyl]propcnq-1-sulfonctq 3637/6/1
人骨骼肌成肌細(xì)胞總RNAHSkMM NAL-Histidine(S)-2-基-3-(4-咪唑基)酸10克BR,99%
HSPA1A Others Human 人 HSP70 / HSPA1A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Bariumchromate902鋇黃100克BR,98%
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A¤;;Wood alcohol
肺動脈成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-山梨醇shēng huà shì jì容量:25克
Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 (aa 1-725) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 言醋-4,4-聯(lián) 4,4'-DIPYRIDYL DIxy7noCHLORIDq 796-7-3
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2DL-2-基shēng huà shì jì容量:1公斤
293T細(xì)胞,SV40永生化的人胚腎上皮細(xì)胞 蚊子細(xì)胞,C6/36細(xì)胞 CL-0250801-D (人巨細(xì)胞性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2三嶙酸脫氧核糖核苷酸shēng huà shì jì容量:RT50克
ZR-75-1(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2613-45-62.4-二甲氧基2,4-Dimetxoxy
U-937細(xì)胞,組織細(xì)胞瘤細(xì)胞 低分化細(xì)胞系,SUNE-1細(xì)胞 CL-03142V6.11(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸雙環(huán)胺(標(biāo)準(zhǔn)品)DICYCLOMINE HYDROCHLORIDE質(zhì)量規(guī)格:供TCL鑒別用
敘利亞倉鼠細(xì)胞系;Syrian Hamster AV12氯解1定(標(biāo)準(zhǔn)品)2-Pyridinealdoxime methochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
MBL1 Others Mouse 小鼠 MBL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸賽庚啶(標(biāo)準(zhǔn)品)CYPROHEPTADINE HYDROCHLORIDE質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
原代系膜細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml(標(biāo)準(zhǔn)品)Amidopyrine/aminopyrine質(zhì)量規(guī)格:含量測定
CDK16 Others Human 人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 沙利度胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Thalidomide質(zhì)量規(guī)格:含量測定
微黃細(xì)頸線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 人細(xì)胞,DU145細(xì)胞 SK-MES-1(人細(xì)胞)白楊素(標(biāo)準(zhǔn)品)Chrysin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品
人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7白楊素Chrysin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CPM Others Human 人 CPM / Carboxypeptidase M 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 刺芒柄花素(標(biāo)準(zhǔn)品)Formononetin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品
人肝星形細(xì)胞RNAHHSteC miRNA5 μg刺芒柄花素Formononetin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / anscobalamin-II 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大豆素,黃豆苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)Daidzein質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。