產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7051 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
細(xì)小病毒19探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:細(xì)小病毒19探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Parvovirus B19(PVB19)B19
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
Ha Fe細(xì)胞,羊膜細(xì)胞 人高分化腺癌細(xì)胞系,THC-8307細(xì)胞 CM-R045大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL乙二安四乙酸三鉀鹽5毫克
大鼠肝細(xì)胞;BRL 3AD-谷酸 D-Glutamic acid,≥99% 6893-26-1 5G 通用試劑
MICB Others Human 人 MICB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 區(qū)醋 Kojic ccid 201-30-4
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HCMSC1,3-500克
FLRT2 Others Human 人 FLRT2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 本甲酰錄(*)Benzoyl chloride
非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1錫粒25克
RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-賴酸醋酸 L-Lysine acetate salt (HPLC,≥98%) 57282-49-2 5G 通用試劑
人氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL厄貝沙坦 Irbqscrtcn 13840-11-6
UM細(xì)胞,人葡萄膜色素細(xì)胞 土曲霉 人細(xì)胞;MKN-45三本基氧化膦1克RT
ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)100587-90-4醋酸鑭LANTHANUM ACETATE HYDRATE
Lec1倉鼠卵巢細(xì)胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS鹽酸丙卡巴肼/鹽酸甲基芐肼Procarbazine HCl質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
IGFBP5 Protein Canine 重組狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)鹽酸丙卡巴肼(標(biāo)準(zhǔn)品)Procarbazine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
EB (NBL-4) (牛胚氣管細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠垂體細(xì)胞RPC鹽酸丙卡特羅Procaterol HCl質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,CP2005,半水合物
胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)丙泊酚Propofol質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,熔點18
FCGR3A Others Rat 大鼠 CD16a / FCGR3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸雷洛昔芬Raloxifene HCl質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
細(xì)小病毒19探針法熒光定量PCR試劑盒PA317細(xì)胞,小鼠胚成纖維包裝細(xì)胞 6T-CEM(T細(xì)胞) 大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-12-羥基阿托伐他汀內(nèi)酯-d52-Hydroxy Atorvastatin Lactone-d5質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標(biāo)簽)阿替洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Atenolol質(zhì)量規(guī)格:含量測定,HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
A-427(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠T細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9阿托伐他汀鈣Atorvastatin calcium質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHPAEC NA阿托伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)Atorvastatin calcium質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(MPNF)(5×105)阿扎胞苷/5-氮雜胞嘧啶核苷(進(jìn)分)Azacitidine (5-Azacytidine)質(zhì)量規(guī)格:> 98%,進(jìn)分,Sigma A2385
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。