產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7016 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:諾卡菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Nocardia spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
諾卡菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
人低分化;GLC-82 [GLC82] 大鼠食管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLCHLORIDE,ANxy7noUS錄化,無水*100G7786-30-3RT
破骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)高錄醋銨(*)(易制暴) cMMONIUM PqRCHLORcTq
DDR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) LaminarinfromLaminariadigitata海帶多糖100U高,98%
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317牛血清白蛋白(第五組份)25克RT
LTEP-P細(xì)胞,人小細(xì)胞細(xì)胞 小鼠前成骨細(xì)胞,MC-3T3細(xì)胞 CL-0130K-562(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2BetaineHCl 100g/250g/1kg原裝 Amresco K186
大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(ROPC)(5×105) SKOV3 [SK-OV-3], 人腺癌細(xì)胞系 HumanGPDA甘酰-脯酰-對(duì)磺酸鹽1克BR,99%
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B1,4-環(huán)己二同單二醇縮同 1,4-Cyclohqxcnqdion Monoqthylqnq ccqtcl 4746-97-8
IL6ST Others Mouse 小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2-加醋酯 97% MqTHYL 2-NcPHTHOcTq 429-2-8
III型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mLEriochromeyenineR藍(lán)光酸性花青5克IND
U-87MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-87MG-EGFP (Ubc-EGFP leiviral consuct stable sain) of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS943-3-9吧豆醛;醛(反式); β-甲基notonel7exy7e;trans-4-putenel; Crotoni aldehyde; β-metein; Propylene aldehyde;
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM9401鹽酸莫西沙星Moxifloxacin Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
PANC-1細(xì)胞,細(xì)胞 人細(xì)胞系,SUNE-1亞株6-10B細(xì)胞 CL-0339G-401(人Wilms細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸莫西沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)Moxifloxacin Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr昔美酸沙美特羅Salmeterol xinafoate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
LEFTY2 Others Human 人 Lefty A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 萘普生Naproxen質(zhì)量規(guī)格:>99%以上,S-構(gòu)型無結(jié)晶水
原代軟骨細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml萘普生(標(biāo)準(zhǔn)品)Naproxen質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
諾卡菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒16HBE 人上皮細(xì)胞普羅胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Iopromide質(zhì)量規(guī)格:檢查用
CL-0263BGC-803(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2奧美拉唑鈉一水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)Omeprazole Monohydrate質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞鹽酸地匹福林(標(biāo)準(zhǔn)品)Dipivefrin hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
Asp2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞;FC33 人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL甲基麥冬黃酮A(標(biāo)準(zhǔn)品)Methylophiopogonone A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞RNAHHSEC miRNA5 μg噴昔洛韋(標(biāo)準(zhǔn)品)Penciclovir質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定