產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7017 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Nocardia transvalensis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
QGY-7701細(xì)胞,細(xì)胞 人宮頸上皮細(xì)胞癌,Ski細(xì)胞 KM小鼠子瘤株;U27伊潘立酮-d3質(zhì)量規(guī)格:Iloperidone-d3
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]亞胺培南一水合物質(zhì)量規(guī)格:Imipenem Monohydrate
ULBP1 Others Human 人 ULBP1 / N2DL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5-羥基吲達(dá)帕胺質(zhì)量規(guī)格:5-Hydroxy Indapamide
人上皮細(xì)胞裂解物HBEpiCL脫氫吲達(dá)帕胺質(zhì)量規(guī)格:Dehydro Indapamide
IL23R Others Cynomolgus 食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) CHPS-Na;3-氯-2-羥基丙磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>98.5%CHPS-Na
IL5 Protein Canine 重組狗 IL5 蛋白 (His 標(biāo)簽)HISTOCHOICETISSUEFIXATIVEWITH18%ALCOHOL組織固定劑組織學(xué)級(jí)無色至微黃無混濁液體RTsigma
人毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞(HHZMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 Mouse1,4-二溴-2- 1,4-DibroMo-2-butqnq;trcns-1,4-DibroMo-2-butqnq 1981/6/7
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A3,5-二氧基本加醋酯 Mqthyl 3,5-dimqthoxybqnzoctq 120-37-0
人骨骼肌細(xì)胞 (HSkMC)( 5×105 )等離子體氧化酶,英文名或英文縮寫:PAO,級(jí)別:BR,50u/mg,規(guī)格:10克
CL-0243WI-38(人胚肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2BAIRD-PARKER瓊脂基礎(chǔ)Baird-Parker Agar Ba
FCER2 Others Rat 大鼠 CD23 / FCER2 / FCER2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸米諾環(huán)素(標(biāo)準(zhǔn)品)Minocycline hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24鹽酸米托蒽醌(進(jìn)分)Mitoxantrone HCl質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分sigma M6545
HLF-02細(xì)胞,人胚肺二倍體細(xì)胞 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-3H & 5H細(xì)胞 CM-M120小鼠角膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸米托蒽醌Mitoxantrone HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
SK-Hep-1(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸米托蒽醌(標(biāo)準(zhǔn)品)Mitoxantrone HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
HUVEC-c pooled 混合來源的人臍內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC) 500,000cells 腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)咪唑立賓Mizoribine質(zhì)量規(guī)格:>98%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)
諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒TNFSF15 Others Rat 大鼠 TNFSF15 / TL1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 貝那普利拉/苯那普利拉(標(biāo)準(zhǔn)品)Benazeprilat質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用
人微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL奧美拉唑硫化物Omeprazole Sulfide質(zhì)量規(guī)格:
MLTC-1細(xì)胞,小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 KG-1(細(xì)胞) 人惡性色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]6-羥基氯唑沙宗6-Hydroxy Chlorzoxazone質(zhì)量規(guī)格:
CX3CL1 Protein Human 重組人 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)6-嘌呤6-Mercaptopurine質(zhì)量規(guī)格:
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 7-甲基-6-嘌呤7-Methyl-6-Mercaptopurine質(zhì)量規(guī)格:
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。