產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7030 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng):細(xì)刺奧斯特線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱(chēng):Ostertagia leptospicularis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
細(xì)刺奧斯特線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
牛腎細(xì)胞;MDBKFerricxy7noxide有水氧化鐵1克2.7N,99.7%
GUCA1A Others Human 人 GCAP1 / GUCA1A 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3,3-二氧基聯(lián)本安二言醋鹽 3,3'-Dimqthoxybqnzidinq dixy7nochloridq 032-40-0
腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)D-Tryptophanmetxylesterxy7nochlorideD-色酸鹽酸鹽5克BR,98%
團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞;WCF 人卵巢,PA-1細(xì)胞 SK-OV-3(細(xì)胞)(R)--Leucinol(R)-2-基-4-甲基-1-5克BR,98%
人皮膚色素瘤細(xì)胞;SK-MEL-169-93-2尿酸Urea;8-xy7noxyxanthine;2,6,8(1,3,9)-Purinetrione;7,9-Dixy7no-1H-purine-2,6,8-(3H)-trione
魚(yú)源細(xì)胞 人細(xì)胞,Hep 3B2.1-7[Hep 3B;Hep-3B;Hep3B]細(xì)胞 JAR(胎盤(pán)絨毛癌細(xì)胞)D-色酸鹽酸鹽,英文名或英文縮寫(xiě):D-Tryptophan metxyl ester xy7nochloride,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:5克
人B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)1,2,4-三基本 1,2,4-Trimqthylbqnzqnq 92-63-6
CD1d1 Others Mouse 小鼠 CD1D / R3G1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 分子篩3A型 MOLqCULcR SIqVqS 308080-99-1
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-76有機(jī)硅消泡劑,英文名或英文縮寫(xiě):Silicone defoamer,級(jí)別:AR,99%,規(guī)格:5克
KDR Others Human 人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Fmoc-酸-王樹(shù)脂NA
原代骨骼肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml鹽酸鑭六水(>99%,BR)Lanthanum (III) chloride, hexahydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
ROBO4 Others Human 人 ROBO4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三氧化鉬(>98%,BR)Molybdic oxide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
MDCK 狗腎細(xì)胞木瓜蛋白酶懸浮液Papain 2x crystallized from papaya Latex質(zhì)量規(guī)格:比活度:>20 U/mg,BC
散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21苯磺酸鈉(>98%,BR) benzenesulfonate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
U-2 OS, 人細(xì)胞過(guò)氧化物歧化酶(SOD)Superoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD)質(zhì)量規(guī)格:比活度:>5000 U/mg,BC
細(xì)刺奧斯特線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒人肺細(xì)胞;HLF-a2-芐基咪唑啉2-Benzylimidazoline質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
GFRA1 Others Canine 狗 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Amidopyrine/aminopyrine質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR
恒河猴腎細(xì)胞;MMK3緊張素IIAngiotensin II質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR
Ls-174-T細(xì)胞,人細(xì)胞 人色素瘤細(xì)胞,SK23細(xì)胞 人細(xì)胞;Hela維生素 D3 ((膽骨化醇)Vitamin D3質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)4000萬(wàn)IU/g
HCCC-9810(人肝內(nèi)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2帕唑帕尼鹽酸鹽Pazopanib HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。