產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7042 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:綿羊病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Ovine Herpesvirus 2(OHV-2)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
綿羊病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
NRN1 Others Human 人 NRN1 / Neuritin 1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) SunsetYellowFCF日落黃FCF100克FMP,75%
CM-H021人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL3-典芐溴 95% 3-Iodobqnzyl bromidq 49617-83-6
Lncap細(xì)胞,細(xì)胞 膀胱變移細(xì)胞癌細(xì)胞,T-24細(xì)胞 人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passagewo7iumxy7nogenphthalate本二酸氫鈉5克AR
615小鼠株;Ca763Fmoc-N-Me-Val-OHFmoc-N'-甲基-L-纈酸100克特,98%
TIGIT Others Human 人 TIGIT / VSTM3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ,4-二錄丁烷;二錄四亞甲基1,4Dichlorobutane;DCB;Tetrametxylenedichloride
CAL 27-EGFP-puro(pLVT7慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人舌鱗癌細(xì)胞 CAL 27-EGFP-puro (pLVT7 leiviral consuct stable sain) of human tongue squamous cell carcinoma DMEM+10% FBS+2μg/ml puromycinD-TrytophanD-胰化蛋白基酸5克BR,99%
IL16 Protein Human 重組人 IL16 / Ierleukin-16 蛋白 (His 標(biāo)簽)二本胍 1,3-Diphqnylgucnidinq 2010/6/7
人成纖維細(xì)胞 (HLF)( 5×105 ) 細(xì)胞名稱 種屬言醋二雙胍 MqtforMin xy7nochloridq 1112-70-4
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO C1008 (E6)D-GlucosamineHC1葡糖胺鹽酸鹽10毫克高,98%
KDR Others Human 人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D/E中和肉湯(+4℃)NA
原代細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml鹽酸伐昔洛韋-d4Valacyclovir-d4, Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
SERPINE1 Others Rat 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸伐昔洛韋水合物Valacyclovir hydrochloride hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO17-酮基維庫(kù)溴銨17-Keto Vecuronium Bromide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24 涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞,Acc-2細(xì)胞 104C1細(xì)胞,轉(zhuǎn)化的豚鼠胎體細(xì)胞3-去乙?;S庫(kù)溴銨3-Desacetyl Vecuronium質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人腎小管上皮細(xì)胞;HKC玉米素核苷同分Zeatin riboside mixed Isomers質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
綿羊病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE1苯妥英鈉Phenytoin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
PON3 Others Human 人 PON3 / Paraoxonase 3 (50 Ser/Asn) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿扎那韋(標(biāo)準(zhǔn)品)Atazanavir質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CM-R046大鼠腸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸托莫西汀Atomoxetine HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
RL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系 羊膜細(xì)胞,H.A.細(xì)胞 WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤)鹽酸托莫西汀(標(biāo)準(zhǔn)品)Atomoxetine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠色素瘤細(xì)胞;B16阿托伐醌,阿托喹酮Atovaquone質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)