產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7081 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:卵形探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Plasmodium ovale
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
卵形探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
BT474細(xì)胞,導(dǎo)管瘤細(xì)胞 人,JEG細(xì)胞 人牙周膜成纖維細(xì)胞RNAHPLR miRNA5 μgACRYL/BIS19:1,PREMIXEDPOWDER酰胺/甲叉 19:1粉末超級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細(xì)胞;B95-8β-紫羅蘭同 4-(2,6,6-Trimqthyl-1-cyclohqxqnyl)-3-butqn-2-onq 79-77-6
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 40%度尿素水1米
人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;C918(酚紅)亮綠瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:100克
NRP2 Others Human 人 Neuropilin 2 / NRP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3001-15-84,4-二聯(lián)本4,4'-Diiodobipxenyl
大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞RA依來藍(lán)R500KU
GAD1 Others Human 人 GAD67 / GAD1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酸1酯 ()-Bornyl acetate,97% 5655-61-8 25G 通用試劑
恒河猴腎細(xì)胞;RM-3乳糖一水 Lcctosq Monohydrctq 2989-81-1
COS-1細(xì)胞,SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞 人細(xì)胞,PA319細(xì)胞 CM-R005大鼠氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLACVA偶氮二基戊酸500毫克CP
大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)57-55-6沒食子酸酯Propyl Gallate; Gallic acid propyl ester; PG;
KM3, 人細(xì)胞 細(xì)胞,HCC-9204細(xì)胞 NCI-H292(細(xì)胞(結(jié)轉(zhuǎn)移))緊張素 片段1-7醋酸鹽水合物Angiotensin Fragment 1-7 acetate salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠細(xì)胞;GT1-1[Val5]-緊張素 II 醋酸鹽水合物[Val5]-Angiotensin II acetate salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
CD2 Others Human 人 CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 阿替洛爾酸Metoprolol Acid質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
興國鯉尾鰭細(xì)胞;XGL(R)-(+)-阿替洛爾(R)-(+)-Atenolol質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) S-(-)-阿替洛爾S-(-)-Atenolol質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
卵形探針法熒光定量PCR試劑盒LncaP, 人細(xì)胞 腹水瘤,SRS-82細(xì)胞 TOV-112D(人上皮性細(xì)胞)馬來酸阿森那平Asenapine Maleate質(zhì)量規(guī)格:>99%
轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞;15P-1ZSTK474ZSTK474;ZSTK-474質(zhì)量規(guī)格:>98%,I型PI3K亞型抑制劑
FCGR1 Others Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷Luteolin 7-O-glucuronide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
人細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826]STA-9090;STA9090Ganetespib質(zhì)量規(guī)格:>98%,HSP90抑制劑
PDE3A Others Human 人 PDE3A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 赤芝酸DLucidenic acid D質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。