產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7088 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:肺孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Pneumocystis spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
肺孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
EDAR Others Human 人 EDAR / DL 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) xyleolOrangetetrawo7iumsalt兒價(jià)分桔黃四鈉5克高
人裂解物HPFL聯(lián)本安;隊(duì)二安基聯(lián)本;4,4′-二安基聯(lián)本 Bqnzidinq;p-DicMinodiphqnyl;p,p′-Bicnilinq 9-87-2
CXADR Others Human 人 CXADR / CAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Di-n-octylamine二辛基胺100毫克BR,98%
BNL CL.2 小鼠胚胎肝細(xì)胞AMPHOTERICINB,SOLUBILIZED可溶性兩性霉素B組織培養(yǎng)級1GCOLD
CL-0134KU812(人外周血嗜堿性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(噻唑藍(lán))
COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0182P815(小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 正常大鼠腎細(xì)胞;NRKElastase彈性硬朊酶5克BR,400u/mg
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-1Raddeanoside 20 Raddeanoside 20 (HPLC,≥98%) 335354-79-5 5MG 標(biāo)準(zhǔn)品
IL3 Others Rat 大鼠 IL3 / ierleukin 3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 律平 III ≥85% (HPLC) FILIPIN III 480-49-9
T-101A胰蛋白酶(含10mL 酶解緩沖液)1mL聯(lián)大茴香,英文名或英文縮寫:3,3'-Dimetxoxybenzidine,級別:BR,4%,規(guī)格:1克
A549, 人細(xì)胞系 T細(xì)胞細(xì)胞,HPB-ALL細(xì)胞 RKO(腺癌細(xì)胞)過氧二鉀NA
CL-0171NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2溴化新斯的明(標(biāo)準(zhǔn)品)Neostigmine bromide質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人癌細(xì)胞;MDA-MB-468 大鼠小腦顆粒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL木蘭脂素Magnolin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Pcc4 小鼠消旋山莨菪堿Racanisodamine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
SIRPG Others Human 人 SIRPG / CD172g 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 磺胺間二甲氧嘧啶鈉Sulfadimethoxine salt質(zhì)量規(guī)格:>98%
新生兒細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)磺胺間二甲氧嘧啶鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Sulfadimethoxine salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
肺孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒MG-63 人成細(xì)胞2'-甲氧基尿苷2’-OMe Uridine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
SK-MES-1人肺鱗癌細(xì)胞 SK-MES-1 human lung squamous carcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSTES. Na;2-[(三(羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸鈉TES 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
EPO Protein Rat 重組大鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)TES;Tris乙磺酸,2-[(三(羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸TES質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系);293T/17 人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸鈉TAPSO mono質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;UACC812TAPSO;3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸TAPSO質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR