產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7095 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
豬巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:豬巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Porcine Cytomegalovirus (PCMV,2)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
IL10RB Others Rat 大鼠 IL10RB / IL10R2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-酚,英文名或英文縮寫:4-xy7noxypyridine,級(jí)別:AR,98.5%,規(guī)格:250毫克
人腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(S)-(-)-α-基-γ... (S)-(-)-3-Aminotetrahydrofuran-2-One H... 2185-3-7 250MG 通用試劑
B16F10細(xì)胞,小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞) SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19L-乳醋內(nèi)鹽(1-13C) L-LcCTIC cCID, wo7ium ScLT (1-13C) 8173-81-6
CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白氧化金shēng huà shì jì容量:RT500毫升
SHG-44 (人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1115-69-1N-乙酰-DL-α-酸2-Acetylamino-propionic acid
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-11000ul無菌盒裝吸頭shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1毫克
IL1R2 Others Human 人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 日落黃 Sunset Yellow FCF 2783-94-0 25G 通用試劑
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]染料木皇同(-20℃) Gqnistqin 446-7-0
IGFBP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN胰蛋白酶抑制劑,大豆試劑級(jí)米白色凍干粉FROZENsigma
肝竇內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)20624-25-3銅試劑wo7ium dietxyldithiocarbamate trihydrate
CSNK1A1 Others Human 人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 銅標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體:1%HNO3)Copper solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體:1%HNO3
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Cobalt standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml
MDA-MB-231細(xì)胞,癌細(xì)胞 人細(xì)胞,Bel-7402細(xì)胞 CL-00086T-CEM (人T細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2六價(jià)鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:水) Chromium Standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:水
倉(cāng)鼠源細(xì)胞鉺標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3)Erbium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3
CDH8 Others Human 人 Cadherin-8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 金標(biāo)準(zhǔn)溶液(100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液)Gold solution質(zhì)量規(guī)格:100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液
豬巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒CTSD Others Human 人 Cathepsin D / CTSD 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Ac-rC亞1酰胺單體Ac-rC Phosphoramidite質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
DLD-1 人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞Rp-腺苷 3′,5′-環(huán)單硫代1酸酯鈉鹽Rp-Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphorothioate, Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CMVECs微內(nèi)皮細(xì)胞 CMVECs micro vascular endothelial cells DMEM+10%FBSSp--腺苷 3′,5′-環(huán)單硫代1酸酯 三乙基銨鹽水合物Sp-Adenosine 3',5'-cyclic monophosphorothioate triethylammonium salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
TNFSF12 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF12 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)2-甲基硫代二1酸腺苷2-(Methylthio)adenosine 5'-diphosphate 3 salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人小梁網(wǎng)細(xì)胞(HTMC)(5×105) 3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞 Mouse腺苷-2',3'-環(huán)1酸 三乙基銨鹽Adenosine 2',3'-Cyclic Phosphate Triethylammonium Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。