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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP7121 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | 詳見說(shuō)明書% |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：鼻疽假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Pseudomonas mallei
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
鼻疽假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
CD34 Others Rat 大鼠 CD34 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DL-正亮酸25克RT
新生兒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鄰拂溴本 2-Bromofluorobqnzqnq 107-82-1
CFSC-8B細(xì)胞，大鼠肝星形細(xì)胞 L-02(正常肝細(xì)胞) tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3E5L-組酸1克RT，避光
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)一性鞋套100U2～8℃
WISH(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T，4-二2,4-Dimetxyl aniline
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7TRIS-HC1BuffersolutionTRIS-HC1緩沖液100克IND，80%
293[HEK-293]細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞 人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化),Hce-8693細(xì)胞 CM-R013大鼠肺大內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL間拂肖基本 1-Fluoro-3-nitnobqnzqnq 40-67-2
大鼠雪旺細(xì)胞;RSC96N-R添加劑shēng huà shì jì容量：RT，避光25克
ENPP7 Others Human 人 ENPP7 / NPP-7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) STPP三聚嶙酸鈉1克工藝級(jí)，90%
大鼠細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.396-98-04-甲基-3-硝基本4-metxyl-3-nitnobenzoic acid
Eca-109(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0246YAC-1(小鼠瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;V79細(xì)胞弛素E(>98%，BR)Cytochalasin E質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5D-樟腦酸(>99%,BR)D-(+)-Camphoric acid質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
CRIP2 Others Human 人 CRIP2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D(+)-二苯甲酰1酸一水(>98%，BR)D-(+)DBTA, Dibenzoyl-D-tartaric acid, monohydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
原代系膜細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝：1ml己二11酸二胺(>98%，BR)DATD, (+)-N,N'-Diallyltartramide質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
mCF, 小鼠成纖維細(xì)胞 小鼠雜交瘤細(xì)胞，7F2細(xì)胞 EL4. IL-2(瘤細(xì)胞)十二1基丁二1(>98%，BR)DDSA, dodecenylsuccinic anhydrous質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
鼻疽假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒AM(人腺樣囊性癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前細(xì)胞;MFC-GFP鹽酸貝他定(進(jìn)口)Bestatin HCl質(zhì)量規(guī)格：≥98%,美國(guó)進(jìn)口
人表皮色素細(xì)胞-中色素總RNAHEM-m NAN-十八烷酰二氫-D-赤-鞘氨醇N-Stearoyldihydro-D-erythro-Sphingosine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
SERPINB4 Others Human 人 SerpinB4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Fmoc-3-苯甲酰-赤-鞘氨醇Fmoc-3-benzoyl-erythro-sphingosine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21D-赤-鞘氨醇(硫酸)D-erythro-Sphingosine (sulfate)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
BEL-7404細(xì)胞，細(xì)胞 人子宮膜腺癌細(xì)胞,HEC-1-B細(xì)胞 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));LA1-VAP33-GFPD-赤-鞘氨醇-1-1酸鹽D-erythro-Sphingosine-1-phosphate質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
