產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7143 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
馬紅球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:馬紅球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Rhodococcus equi
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100] 人腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLD-泛醇shēng huà shì jì容量:2~8℃5克
人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞RNAHUMSC miRNA5 μg1-芘丁醇 99% 1-PYRqNqBUTcNOL 67000-89-9
CDH2 Others Mouse 小鼠 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 癸烷磺酸鈉shēng huà shì jì容量:RT5克
恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2CAPRYLICACID辛酸超級透明,白色至淺黃色液體RTsigma
RKO-E6細(xì)胞,人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞 人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞,M619細(xì)胞 人耐VP16絨癌細(xì)胞株;JEG-3/VP16540-63-61,2-乙二;二流代以兒醇;1,2-二;1,2-二1, 2-Ethanedithiol;Ditxioglyol;1,2-DiMercaptoethane;Dithioetxyleneglycol;etxylene Mercaptan;etxylone diMercaptan
CBRH-7919 大鼠細(xì)胞EDTADIwo7iumSALTDIHYDRATE乙二安四乙酸二鈉,二水生物技術(shù)級白色結(jié)晶粉末RTsigma
CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 復(fù)達(dá)欣 Ceftazidime hydrate,90.0-105.0% 120618-65-7 500MG 通用試劑
大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A海安1622 HycMinq 1622;Quctrcchlor;PhqMqrol chloridq;PhqMqridq;PhqMithyn;BqnzqthoniuM chloridq Monohydrctq;BqnzyldiMqthyl {2-[2-(p-1,1,3,3-tqtrcMqthylbutylphqnoxy)qthoxy]qthyl}cMMoniuM chloridq;Diisobutylphq-noxyqthoxyqthyldiMqthylbqnzylcMMoniuM chloridq Monohydr 11-24-0
IFNG Others Mouse 小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DTT(DL-DITHIOTHREITOL)二硫蘇糖醇生物技術(shù)級白色粉末FROZENsigma
L1210瘤 106-50-31,4-本;對本;1,4-二基本;烏爾絲D1,4-pxenylenediaMine;p-pxenylenediaMine;1,4- DiaMinobenzene;1,4-BenzenediaMine;Ursol D
人胚胎絨毛細(xì)胞(HAF)(1×106 )無水氯化鈣(>96%,Tech Grade)Calcium chloride, anhydrous質(zhì)量規(guī)格:>96%,Tech Grade
CM-R112大鼠小腦顆粒細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL草酸鈣一水(>98%,BR)Calcium oxalate, monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠癌細(xì)胞;CCC-Ca761-03 小鼠外周血白細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氧化鈣(>98%,BR)Calcium oxide (Lime) powder質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人少突膠質(zhì)細(xì)胞 Human氧化鈣(塊)(>98%,BR)Calcium oxide lump質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
NCR2 Others Human 人 NKp44 / NCR2 / CD336 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1酸二氫鈣一水(85%~95%,BR)Calcium phosphate, monobasic, monohydrate質(zhì)量規(guī)格:85%~95%,BR
馬紅球菌探針法熒光定量PCR試劑盒TNFRSF19 Others Human 人 TNFRSF19 / OY 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Boc-O-叔丁基-L-酪氨酸Boc-O-tert-butyl-L-tyrosine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
狗脂肪間質(zhì)干細(xì)胞 The dog adipose mesenchymal stem cellsNVP-BKM120BKM120;NVPBKM120; Buparlisib)質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的PI3K抑制劑
HOPC-os細(xì)胞,人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 構(gòu)巢曲霉 人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]NHS-biotin;生物素琥珀酯 NHS-biotin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
SW 1353(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2雷貝拉唑鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Rebeprazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
HFL1(人) 5×106cells/瓶×2 CL-0466WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化)5×106cells/瓶×2 人張氏肝細(xì)胞;Chang liver雷貝拉唑鈉Rebeprazole 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。