產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7151 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
牛瘟病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:牛瘟病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Rinderpest Virus
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DHA脫氫醋酸10克BR
人口腔角質(zhì)細(xì)胞裂解物HOKL鹽酸環(huán)胞苷 Ancitabine hydrochloride 10212-25-6 1G 通用試劑
IGFBP6 Others Human 人 IGFBP6 / IBP-6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 六拂鱗醋 Hqxcfluorophosphoric ccid;
BRL-3A 大鼠正常肝細(xì)胞dTTP(2'-DEOXYTHYMIDINE-5'-TRIPHOSPHATE)TRIwo7iumSALTDIHYDRATE dTTP, Na3, 2H2O超級白色干燥結(jié)晶粉末FROZENsigma
CL-0118HT-29(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×299-76-3尼泊金metxylparaben
肺大平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)聚乙二醇6000500克
Molt-4細(xì)胞,人T細(xì)胞(CD8+) 小鼠胰腺腺泡細(xì)胞癌細(xì)胞,MPC-83細(xì)胞 人尿道上皮細(xì)胞cDNAHUC cDNA2,2-聯(lián)≥99% 2,2'-Dipyridyl 366-18-7
PA-1(人卵巢腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸胍1克
CRFK(貓腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0190RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]布氏肉湯25毫升
大鼠細(xì)胞;MMQ68399-77-93-(N-嗎啉基)-2-羥基丙磺酸 (MOPSO)MOPSO
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0922 人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL特比萘芬-d7鹽酸鹽Terbinafine-d7 Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1羥基特比萘芬Hydroxy Terbinafine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
C10ORF54 Others Human 人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 羥基特比萘芬β-D-葡萄糖苷酸Hydroxy Terbinafine β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
U-87 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-87 MG of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS胸腺五肽Thymopentin質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
SF767細(xì)胞,人細(xì)胞 陰溝腸桿菌 人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHAEC NA替米考星1酸鹽Tilmicosin phosphate salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
牛瘟病毒探針法熒光定量PCR試劑盒ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM2 / CD102 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-亞硝基-N-甲基尿烷(>95.0%(GC))N-Methyl-N-nitrosourethane質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
人T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;Jurkat D,EMUG;4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸4-MUG質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
NOTCH1 Others Mouse 小鼠 Notch-1 / NOTCH1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 米諾地爾Minoxidil質(zhì)量規(guī)格:>98%
CM-R030大鼠腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL米諾地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Minoxidil質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系 牛胚氣管細(xì)胞,EB細(xì)胞 Hs 578T(人成纖維細(xì)胞)米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶Minoxidil Sulfate質(zhì)量規(guī)格:>99.0%
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。