產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7164 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:肯塔基沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Salmonella kentucky
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
肯塔基沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
ACHN(人細胞) 5×106cells/瓶×2Eserine伊色林500克BR,98%
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 3,3’-二安基聯(lián)本安 3,3'-Dicminobqnzidinq 91-92-
牛腎細胞;MDBK(BVDV-free)DNHP1,2-本二酸二己酯1克BR,98%
CD70 Others Rat 大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 人細胞裂解液 (陽性對照) pxenOL:xlonofonm,LOWPH酚:錄仿:異 25:24:1(pH 5.2)生物技術級400MLCOLD
人完全培養(yǎng)基 100mL13011-54-61酸氫鈉銨四水合物wo7ium AMMONIUM PHOSPHATE
人結直腸腺癌細胞;HT-29大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準品)Emodin-8-glucoside質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
PLAU Others Human 人 Urokinase / PLAU (activated by ypsin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 異蓮心堿(標準品)Isoliensinine質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Daudi 人成巨核細胞細胞蓮心堿高氯酸鹽(標準品)Liensinine Perchlorate質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
LoVo人細胞 LoVo human colon cancer cells DMEM/F12(1:1)+10% FBS丁1基苯酞(標準品)3-Butylidenephthalide質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品川芎提取,液體
TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標簽)茯苓酸(標準品)Pachymic acid質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠瘤細胞(NK靶細胞);YAC-1扶洛芬,英文名或英文縮寫:Florfenicol,級別:II型,95%,規(guī)格:200毫升
SERPINI1 Others Human 人 SERPINI1 人細胞裂解液 (陽性對照) 前杯莧甾酮 Precyasterone (HPLC,≥96%) 27335-85-9 5MG 標準品
大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-1皇速腺嘌呤二核苷醋(-20℃) Flcvin cdqninq dinuclqotidq diwo7ium sclt 84366-81-4
ACO2 Others Mouse 小鼠 ACO2 / Aconitase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) HCTISSUEFIXATIVEA組織固定劑組織學級20LRT
CL-0017A673(人橫紋肌瘤細胞)5×106cells/瓶×210031-30-8過1酸鈣Calcium phosphate monobasic
肯塔基沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒CD40 Others Rat 大鼠 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉TAPS Salt質量規(guī)格:>99%,BR
Wistar大鼠骨髓間質干細胞 Wistar rat bone marrow mesenchymal stem cellsTAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T))TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]質量規(guī)格:>99.0%(T)
SH-SY5Y細胞,人神經(jīng)上皮瘤細胞 粘質沙雷氏菌 人肝細胞RNAHH miRNA5 μg二甲基偶氮磺IIIDimethylsulfonazo III質量規(guī)格:堿性稀土金屬用的分光光度試劑及硫酸根用鋇的沉淀滴定指示劑
SK-CO-1(人結直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2偶氮磺III(>90.0%(HPLC))Sulfonazo III 質量規(guī)格:>90.0%(HPLC)
HCT-8(人盲腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0402NCI-H520(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細胞;MMK32-(4-磺基苯偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸三鈉鹽水合物(>95.0%(HPLC))3 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate質量規(guī)格:>95.0%(HPLC)