產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7165 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:火雞沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Salmonella meleagridis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
火雞沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
人癌細(xì)胞;MDA-MB-468Flurprimidol2-甲基-1-嘧啶-5-基-1-(4-三扶甲氧基本基)丙-1-醇1KU高,98%
TF Others Human 人 ansferrin / TF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-溴-3-基-2- 3,3-Dimqthylcllyl bromidq 870-63-3
牛腦垂體提取物BPEEDACoHC11-乙基-(3-二甲基基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽100毫克高,99%
GAP43 Others Human 人 GAP43 / Neuromodulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 羥基乙酸shēng huà shì jì容量:100毫克
CHL-Don 中國倉鼠肺成纖維樣細(xì)胞(-N,N-雙
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM [COLO320DM]達(dá)比加群Dabigatran質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CCDC47 Others Human 人 CCDC47 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 瑞格列奈Repaglinide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL瑞格列奈(標(biāo)準(zhǔn)品)Repaglinide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
P815細(xì)胞,小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞 V79-4(中國倉鼠肺細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-CD-阿拉伯糖D-(-)-Arabinose 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標(biāo)簽)D-阿拉伯糖(標(biāo)準(zhǔn)品)D-arabinose質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
QBC-939, 人細(xì)胞 (瘤株),Ke-3細(xì)胞 HL-60(急性粒細(xì)胞細(xì)胞)Estradiolβ-雌二醇100克CP,99%
小鼠細(xì)胞;Sp2/0-Ag1417-羥基 sprengerin... Hydroxy Sprengerinin C, 17 (HPLC,≥98%) 1029017-75-1 10MG 標(biāo)準(zhǔn)品
FLT3 Others Human 人 FLT3 / FLK2 / CD135 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-拂-2’-脫氧脲核苷 Floxuridinq 20-91-9
大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1寶石紅蛋白染色試劑,英文名或英文縮寫:SYPRO red protein stain,級別:高,95%,規(guī)格:500克
人成纖維細(xì)胞( HCF) ( 5×105 )9032-75-1果膠酶(+4℃)Pectinase
火雞沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-4742,2'-二羥基偶氮苯(>98.0%(T))2,2'-Dihydroxyazobenzene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) S-乙酰半胱氨酸鹽酸S-Acetamidomethyl-L-cysteine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CM-R022大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLO-叔丁基-L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽O-tert-Butyl-L-threonine methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:0.98
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞 牛腎細(xì)胞,MDBK細(xì)胞 Hs 578Bst(人成纖維細(xì)胞)L-丙氨酸異丙酯鹽酸鹽L-Alanine isopropyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1L-天冬酰胺甲酯鹽酸鹽Methyl L-asparaginate monohydrochloride質(zhì)量規(guī)格:0.98
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。