產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7195 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:綿羊痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Sheeppox Virus(SPPV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
綿羊痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
Jurkat, Clone E6-1人T細(xì)胞細(xì)胞 Jurkat, Clone and E6-1 in human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS1,5-萘二磺酸四水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%Naphthalene-1,5-disulfonic acid tetrahydrate
FGF17 Protein Human 重組人 FGF17 蛋白色酚AS醋酸鹽(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCNaphthol AS acetate
BC3H1(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-HEK-a氯代丁二乙(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRNCS, N-Chlorosuccinimide
人細(xì)胞;MKN-45n-Dodecyl-b-D-thiomaltoside質(zhì)量規(guī)格:BRn-Dodecyl-b-D-thiomaltoside
人卵巢微內(nèi)皮細(xì)胞(HOMEC) ( 5×105 )1,4-雙[(1H-咪唑-1-基)甲基]苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,4-Bis[(1H-imidazol-1-yl)methyl]benzene
人肺間充質(zhì)干細(xì)胞cDNAHPMSC cDNA脫羧氯雷他定/地氯雷他定(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Desloratadine
豬源細(xì)胞 皮膚細(xì)胞,CCD-1095Sk細(xì)胞 ZM755細(xì)胞,615小鼠滑膜瘤株地塞米1酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>98%,USPDexamethasone Phosphate
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293);APP-PS1地塞米1酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Dexamethasone Phosphate
HA Others H5N2 甲型 H5N2 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-蛋氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD-Mine
CL-0292MKN45(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2索非布韋質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRSofosbuvir (GS-7977)
Caki-2 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞 Caki-2 human renal clear cell carcinoma cells McCoy's 5A Media (Modified with icine) 10%FBSHRP標(biāo)記羊抗馬IgG250克
EGFL7 Protein Mouse 重組小鼠 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 標(biāo)簽)1-拂-2-肖基本 1-Fluoro-2-nitnobqnzqnq 1493-7-
TG-905(人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-GLUCOSE,ANxy7noUSD-葡萄糖,無水生物技術(shù)級白色精細(xì)粉末RTsigma
大鼠海馬神經(jīng)元RN-hxy7noGENPEROXIDEACS級透明無色液體COLD不sigma
TAOK3 Others Human 人 TAOK3 / JIK / MAP3K18 (aa 1-411) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5337-93-94-甲基本4'-metxylpropiopxenone
綿羊痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒人表皮角質(zhì)細(xì)胞cDNAHEK cDNA培美曲塞-15N,13C5Pemetrexed - Labeled 15N,13C5質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
RPE Others Mouse 小鼠 RPE / RPE2-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-硝基-L-精氨酸甲酯N'-Nitro-L-arginine-methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%
人脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN-苯甲酰-L-酪氨酸乙酯(BTEE)N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester質(zhì)量規(guī)格:>98%
ZA1細(xì)胞,轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細(xì)胞 PC-12未分化(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤) 中國倉鼠肺細(xì)胞;R 1610 [R1610]AEBSF絲氨酸抑制劑AEBSF HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白AEBSF(進(jìn)分)AEBSF HCl質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分TCI A2215
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。