產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7210 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
表皮葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:表皮葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Staphylococcus epidermidis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
L-6TG細(xì)胞,肌母細(xì)胞 人細(xì)胞,JCA-1細(xì)胞 人胚;MRC-5間硝基本胺100u
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4啊利新藍(lán)8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1
ECE2 Others Human 人 ECE-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) γ-環(huán)糊精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3
人腎上皮細(xì)胞總RNAHREpiC NA,英文名或英文縮寫:potewwium xy7noxide,級別:CP,98%,規(guī)格:100克
小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(MOPC)(5×105)N-AcetylneuneminicAcid 25mg/100mg原裝 INALCO1758-0100
人表皮角質(zhì)細(xì)胞-cDNAHEK-acDNA6-硫鳥嘌呤(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品6-TG/Thioguanine
MCF/Adr細(xì)胞,人癌阿霉素耐藥細(xì)胞株 團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞,WCF細(xì)胞 骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)維A酸;全反式維A酸;維生素A酸;視黃酸質(zhì)量規(guī)格:>98%%,USP,BRAll-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin
2V6.11(人胚腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2維A酸;(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品All-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin
HCF Pellet 人類成纖維細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HA-h L比卡魯胺質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRBicalutamide
CL-0210SiHa(人子宮頸鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×26-芐氨基嘌呤質(zhì)量規(guī)格:>99%6-Benzylamino purine
大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3無水三錄化,英文名或英文縮寫:Chromium(III) chloride anxy7nous,級別:標(biāo)準(zhǔn)品,99%,規(guī)格:5克
LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三氧化二鈷 COBcLT(III) OXIDq BLcCK 1308-04-9
LA795瘤 肺腺癌IMIDAZOLE咪唑蛋白組學(xué)級白色至淺黃色固體RTsigma
SK-OV-3人細(xì)胞 Human ovarian cancer cell line SK-OV-3 McCoy'5A+10% FBS4,4′-亞甲基二安替比林,英文名或英文縮寫:DAM,級別:AR,99%,規(guī)格:500克
FLT3LG Protein Mouse 重組小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)Ampholine PH4-6/5-7/6-9/3-9.5 國產(chǎn)
表皮葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒SK-N-SH細(xì)胞,人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 環(huán)狀芽孢桿菌 人上皮細(xì)胞RNAHPEpiC miRNA5 μg氫氧化鈣(>95%,BR)Calcium hydroxide質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
SF767(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2N-甲酰伐倫克林N-Formyl Varenicline質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
HCT-15(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4BN-葡萄糖苷伐倫克林Varenicline N-Glucoside質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人細(xì)胞;CNE-2Z伐倫克林氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 去乙?;L春瑞濱Deacetyl Vinorelbine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。