產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7209 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:產(chǎn)色葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Staphylococcus chromogenes
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
產(chǎn)色葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
人整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100]N-苯基-9-蒽胺(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)N-Phenyl-9-anthramine
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-萘(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1-Iodonaphthalene
CM-H042人肝內(nèi)膽管上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL苯并[a]蒽(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Benz[a]anthracene
HCT116細胞,人結(jié)細胞 人色素瘤細胞,HME1細胞 人胚肺二倍體細胞;KMB-171H-環(huán)五[l]菲(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)1H-Cyclopenta[l]phenanthrene
GBC-SD(人細胞) 5×106cells/瓶×29-氨基喜樹堿質(zhì)量規(guī)格:美國進口9-Aminocamptothecin
人表皮內(nèi)管皮細胞(HDLEC)(5×105) 人星形膠質(zhì)細胞 Human化鉀溶液(100g/L)質(zhì)量規(guī)格:100g/LPotassium iodide solution
CM-H028人內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL化鉀溶液(1/60mol/L(0.1N))質(zhì)量規(guī)格:1/60mol/L(0.1N)Potassium iodide solution
AGA Others Human 人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 人細胞裂解液 (陽性對照) 潮霉素B(羅氏原裝)質(zhì)量規(guī)格:羅氏原裝,濃度50mg/mlHygromycin B
上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)芹菜苷; 芹黃苷質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Apiin
293001B細胞,Sars蛋白表達株 人導管癌細胞,MDA-MB-453細胞 口腔角質(zhì)細胞培養(yǎng)基OKM-prf柯伊利素-7-O-葡萄糖苷,野決明苷質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標準品Chrysoeriol 7-O-glucoside
人脈絡(luò)絲表皮細胞 (HCPEpiC)( 5×105 )LBBROTH,MILLER(LURIA-BERTANI)LB肉湯組織培養(yǎng)級米白色至棕褐色粉末RTsigma
成骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3-異丁基-1-基皇嘌呤(-20℃) 3-ISOBUTYL-1-MqTHYLXcNTHINq 88-28-4
人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431] 大鼠小腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLADENOSINEFREEBASE腺苷*白色晶體或結(jié)晶粉末COLDsigma
DCS 小鼠樹突狀細胞細胞RIBOZOL,RNAEXTRACTIONREAGENTRiboZol RNA 抽提試劑100 mlRT
EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細胞裂解液 (陽性對照) (兩性電解質(zhì)) 12ml
產(chǎn)色葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒QBC-939, 人細胞 Human柚皮素-4'-O-β-D-葡萄糖苷酸Naringenin-4'-O-beta-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
SFTPD Others Cynomolgus 食蟹猴 SFTPD / COLEC7 / Collectin-7 人細胞裂解液 (陽性對照) N-羥基丁二(>98%,BR)N-Hydroxysuccinimide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人細胞;CNE-2Z沒食子酸一水物(標準品)Gallic acid monohydrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
IL25 Others Rat 大鼠 Ierleukin 25 / IL25 / IL17E 人細胞裂解液 (陽性對照) 沒食子酸一水物Gallic acid monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR
SD大鼠骨髓間質(zhì)干細胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells1-酮戊二酸二鈉鹽(>98%,BR)a-Ketoglutaric acid, di salt, dihydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。