產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7216 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
路鄧葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:路鄧葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Staphylococcus lugdunensis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
Hut-78細(xì)胞,皮膚T細(xì)胞瘤 人平滑肌,T/G細(xì)胞 人低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細(xì)胞;OCM-1ASulfo NHS;N-羥基硫代琥珀質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRsulfo-NHS
A9(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2亞甲蘭,亞甲基藍(lán)質(zhì)量規(guī)格:BSMethylene Blue
PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸沃尼妙林質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRValnemulin HCl
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S51酸泰樂菌素質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRTylosin phosphate
DKKL1 Others Human 人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 白鮮堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Dictamnine
平滑肌細(xì)胞生長添加物-無血清SMCGS-sf滅草?。?biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Monuron
TE 353.Sk細(xì)胞,人正常皮膚細(xì)胞 人胚腎上皮包裝細(xì)胞,GP2-293細(xì)胞 原代滑膜皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml煙嘧磺?。?biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Nicosulfuron
山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1鈮標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mlNiobium standard
REN Others Human 人 RENIN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體:1%HNO3)質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體:1%HNO3Nickel Standard
CM-M125小鼠牙細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水)質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:水Potassium standard
大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A羧甲基葡聚糖凝膠C-25200u保存:-20℃
人心肌細(xì)胞 (HCM) (1×106 )2,4-二錄-5-氧基本安 2,4-Dichloro-5-mqthoxycnilinq 98446-49-
CL-0003293A (人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2微量可調(diào)移液器P100025克
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2 小鼠成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL焦鉀shēng huà shì jì容量:500克
人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Human83949-45-52-酚-3,7-二磺酸二鈉Diwo7ium 2-naphthol-3,7-disulfonate
路鄧葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒人細(xì)胞;Hela S3 [HeLaS3] 大鼠大隱平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL5-乙酰水楊酸5-Acetylsalicylic acid質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
AtT20 小鼠細(xì)胞N-芐基甘氨酸N-Benzylglycine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR
VSIG4 Others Human 人 VSIG4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 扎那米韋Zanamivir質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,一水物
人癌細(xì)胞;MDA-MB-435S扎那米韋(標(biāo)準(zhǔn)品)Zanamivir質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 去氧氟尿苷/5'-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。