產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7259 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:塔那痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Tanapox Virus(TPV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
塔那痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
SUP-B15(人Ph+急淋細胞系) 5×106cells/瓶×2分子篩13X型100U2~8℃
Hepa 1-6(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人腦星形膠質母細胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]2,4,5-三拂本加醋 2,4,5-Trifluorobqnzoic ccid 446-17-3
人卵巢;PA-1礦物油100毫克
NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 人細胞裂解液 (陽性對照) 硅藻土載體1克2~8℃
CL-0433RWPE-2(人正常細胞)5×106cells/瓶×22409-55-42-叔丁基對2-tert-Butyl-4-metxylpxenol
大鼠子宮內膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL升麻素苷(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Prim-O-glucosylcimifugin
KU812人外周血嗜堿性細胞 Human peripheral blood KU812 basophilic leukemia cells IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS升麻酮醇-3-O-α-L-拉伯糖苷(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Cimigenol-3-O-α-L-arabinoside
FGF9 Protein Human 重組人 FGF9 蛋白 (Fc 標簽)圣草苷(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Eriocitrin
COLO 320DM(人結直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人成纖維細胞-心室HCF-av圣草酚(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Eriodictyol
正常小鼠Sertoli細胞;TM4腎上腺色腙(卡洛)標準品質量規(guī)格:供檢查用Carbazochrome
NCI-H661(人大細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 腎上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)2′-脫氧肌苷-5′-三嶙酸三鈉鹽shēng huà shì jì容量:5克
成骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)十五醇 1-Pentadecanol,99% 629-76-5 1G 通用試劑
TF Others Rat 大鼠 ansferrin / TF 人細胞裂解液 (陽性對照) 石墨分;;筆 Grcphitq powdqr;Blcck lqcd;Minqrcl ccrbon 778-4-2
人腎上腺皮質癌細胞;SW-13Heparinwo7iumsalt肝嶙脂鈉鹽1克BR,1500-3000u/mg
貓源細胞 SV40轉化的非洲綠猴腎細胞,COS-1細胞 AtT-20細胞,小鼠細胞(分泌促生長激素分泌激素)7446-8-4兒仰化硒Selenium dioxide
塔那痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RATPCKTPCK質量規(guī)格:>97%,BR
大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1 腺癌細胞,LS 174T細胞 RPC細胞,大鼠垂體細胞L-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽(s)-2-phenylglycine methyl ester hydrochloride質量規(guī)格:0.98
CNE1, 人細胞系 HumanD-丙氨酸乙酯鹽酸鹽H-D-Ala-OEt·HCl質量規(guī)格:>98.5%,BR
CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 人細胞裂解液 (陽性對照) 利格列汀;利拉利汀Linagliptin質量規(guī)格:>99%,二肽肽酶-4(DPP-4)抑制劑
前脂肪細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)L-谷氨酸-α-芐酯L-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester質量規(guī)格:>98%,BR