產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7265 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:環(huán)紋背帶線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱:Teladorsagia circumcincta
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
環(huán)紋背帶線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
腦內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)wo7iumMETABISULFITE焦亞鈉(重亞鈉)ACS級(jí)白色粉末RTsigma
IB2 Others Human 人 IB2 / B2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-氧基-1,2-炳二醇 3-qTHOXY-1,2-PROPcNqDIOL 1874-6-0
小鼠成肌細(xì)胞;C2C12蠟樣芽孢桿菌計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基支RT
Lec1細(xì)胞,卵巢細(xì)胞 人細(xì)胞,FL62891細(xì)胞 CL-0152MDA-MB-453(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2NEUTRALRED>90%中性紅*暗綠色粉末RTsigma
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K113986-18-0四水合扶化鋅ZINC FLUORIDE TETRAHYDRATE
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-1川陳皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)Nobiletin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MGC80-3細(xì)胞,細(xì)胞 人細(xì)胞,TU212細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK川楝素(標(biāo)準(zhǔn)品)Toosendanin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12川芎嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Tetramethylpyrazine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 川芎嗪Tetramethylpyrazine質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μg川續(xù)斷皂苷VI;木通皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)Asperosaponin Ⅵ質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
TCN2 Others Human 人 TCN2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) TOOSwo7iumsaltN-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)間胺鈉鹽25克BR,98%
腸平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)氘代晴 cCqTOnitnILq-D3 06-6-0
BTC Others Human 人 BTC / Betacellulin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-10 9050-68-4 25G 分離試劑
人B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS乙二安四乙酸二鈉鋅鹽100克2~8℃
293E細(xì)胞,穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,CTLA4 Ig-24細(xì)胞 CL-0286M1(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×228631-66-5本胺藍(lán)CI 42755
環(huán)紋背帶線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒615小鼠滑膜瘤株;ZM755維庫(kù)溴銨(標(biāo)準(zhǔn)品)Vecuronium Bromide質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
LTEP-s細(xì)胞,人肺鱗癌細(xì)胞 小鼠皮膚細(xì)胞,JB6-C30細(xì)胞 CL-0114Hs 578T(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2JNJ-26854165 (Serdemetan)JNJ 26854165質(zhì)量規(guī)格:>98%
Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2SB505124SB-505124質(zhì)量規(guī)格:>98%
HBdMEC-c 人膀胱微內(nèi)皮細(xì)胞(HBdMEC) 500,000cells 皮下脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)NLG919NLG-919質(zhì)量規(guī)格:>98%,IDO抑制劑
成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)維莫德吉(GDC0449)Vismodegib;GDC-0449質(zhì)量規(guī)格:>98%,hedgehog抑制劑