產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7273 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:呂氏泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Theileria lowenshuni
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
呂氏泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
KG-1細(xì)胞,細(xì)胞 人細(xì)胞,Hep3B2.1-7細(xì)胞 CL-0032BEL-7404(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2川楝素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Toosendanin
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21川芎嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Tetramethylpyrazine
F11R Others Human 人 JAM-A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 川芎嗪質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BRTetramethylpyrazine
外周血白細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)川續(xù)斷皂苷VI;木通皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Asperosaponin Ⅵ
CD300A Others Human 人 CD300A / CMRF-35H / IGSF12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 赤芝酸E質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%Lucidenic acid E
大鼠肝星形細(xì)胞RHSteC來曲唑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Letrozole
NCI-H596[H596]細(xì)胞,人細(xì)胞 人細(xì)胞,SK-RC-42細(xì)胞 人肝星形細(xì)胞HHSteC醋酸亮丙瑞林質(zhì)量規(guī)格:>97%.BRLeuprorelin Acetate (Leuprolide Acetate)
小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2氟米龍醋酸酯質(zhì)量規(guī)格:>97%Fluorometholone Acetate
NCR3 Others Human 人 NKp30 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 十溴二苯質(zhì)量規(guī)格:>98%Pentabromophenyl ether
CM-R068大鼠腎小管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL氨基雜環(huán)鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%3-Amino-3-azabicyclo[3.3.0]octane hydrochloride
HBE, 正常人上皮細(xì)胞系 二氫葉酸缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞,CHOdhfr細(xì)胞 CCD-1095Sk(皮膚細(xì)胞)6-脫氧-L-甘露糖,英文名或英文縮寫:L(+)-Rhamnose monohydrate,級(jí)別:高,90%,規(guī)格:5毫克
人胃腺癌細(xì)胞;SGC-7901 [SGC7901]Boc-L-纈安醋 (S)-2-(Boc-cmino)-3-mqthylbutyric ccid 13734-41-3
CD55 Others Human 人 CD55 / DAF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 順二臘酐;失水蘋果臘酐;2,5-呋二同;馬來臘酐;順酐;二輕-2,5-二氧代呋;;順丁二臘酐 Mc;cis-Butqnqdioic cnhydridq;Toxilic cnhydridq;2,5-Furcndionq
草魚肝臟細(xì)胞;L88244,4'-二羥基二本砜,英文名或英文縮寫:SDP,級(jí)別:特,96%,規(guī)格:1克
Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein (ECD 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 7365-45-94-乙磺酸HEPES,1M SOLUTION
呂氏泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒臍平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)酮基他米巴羅汀Keto Tamibarotene質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) ent-伏立康唑ent-Voriconazole質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠正常肝細(xì)胞;NCTC 1469 [NCTC1469]外消旋左旋甲狀腺素鈉DL-Levothyroxine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA 小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)之融合細(xì)胞,NG108-15[108CC15]細(xì)胞 LM8細(xì)胞,C3H小鼠細(xì)胞β-煙酰胺腺嘌呤二核苷1酸酸鈉鹽β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人胚;MRC-5硫酸腺嘌呤二水化合物Adenine Hemisulfate Dihydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口