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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  5-Aminoindole  5192-03-0  中文名：5-氨基吲哚  分子式：C8H8N2 

兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Aminoindole  中文名：5-氨基吲哚  分子式：C8H8N2  度：98.0%

兔去甲上腺素elisa試劑盒   兔去甲上腺素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔去甲上腺素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔去甲上腺素試劑盒、兔去甲上腺素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  5-Aminoindazole  19335-11-6  中文名：5-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%   

兔去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           5-Aminoindazole  中文名：5-氨基吲唑  分子式：C7H7N3 

兔去甲上腺素(NA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone  中文名：4-苯甲?；?span>-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮  分子式：C17H14N2O2  度：98.0%
COL2A1 Others Human  COL2A1 (aa 1242-1487) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-氮雜-12-冠4-(>98.0%(T))1-Aza-12-crown 4-Ether質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-764'-乙酰苯并-15-冠-5-(>95.0%(GC))4'-Acetylbenzo-15-crown 5-Ether質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 383-502) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二羥基萘(>98%,BR)1,3-Dihydroxynaphthalene質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

胎兒成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1,4-3,6-雙脫水甘露醇(>98%,BR)1,4-3,6-Dianhydro-D-mannitol質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

魚源細(xì)胞 細(xì)胞，Hep 3B2.1-7[Hep 3B;Hep-3B;Hep3B]細(xì)胞 JAR(胎盤絨毛癌細(xì)胞)1,4-環(huán)己二酮(>98%,BR)1,4-Cyclohexanedione質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
CES2 Others Mouse 小鼠 CES2 / Carboxylesterase-2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 木犀草素Luteolin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%,BR

成纖維細(xì)胞-胎兒RNAHEF-f miRNA5 μg木犀草素（標(biāo)準(zhǔn)品）Luteolin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CXCL12 Others Cynomolgus 食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 熊果酸Ursolic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥85%,BR

THP-1 單核細(xì)胞細(xì)胞熊果酸；烏蘇酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Ursolic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0418QGY-7703(細(xì)胞)5×106cells/瓶×2香葉木素Diosmetin質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR
Ethyl rutinoside  中文名：蕓香糖乙苷  分子式：C14H26O10  度：98.0%  兔子催乳素elisa試劑盒   兔子催乳素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子催乳素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子催乳素試劑盒、兔子催乳素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

18-Hydroxytritriacontan-16-one  中文名：  分子式：C33H66O2  度：98.0%  兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

粗球孢子菌PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）Mannitol  中文名：甘露醇  分子式：C6H14O6  度：98.5%  兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Phomaligol A  中文名：  分子式：C14H20O6  度：%  兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

ucralose  中文名：三氯蔗糖  分子式：C12H19Cl3O8  度：99.0%  兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝