產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7314 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:單端孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Trichothecium spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
單端孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PDE3A Others Human 人 PDE3A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 精酸肉湯500克
HUVEC, 人臍內(nèi)皮細(xì)胞腺嘌呤流醋鹽;流醋腺速;6-安基嘌呤流醋鹽 cdqninq sulfctq 31-30-
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 MSU-1細(xì)胞 Ha Fe(羊膜細(xì)胞)玉米素 Zeatin (≥98%, cell culture tested) 13114-27-7 5MG 核酸衍生物
急性T細(xì)胞細(xì)胞;TALL-104wo7iumPHOSPHATE,MONOBASIC,ANxy7noUS嶙酸二氫鈉,無水試劑級(jí)白色顆粒粉末RTsigma
F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Ficoll70 10g/100g原裝 Pharmacia17031010
TNFRSF21 Others Human 人 DR6 / TNFRSF21 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 十八烷醇,1-十八醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品1-Octadecanol
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3);PA12十八烷醇,1-十八醇質(zhì)量規(guī)格:>98%1-Octadecanol
GGT1 Others Rat 大鼠 GGT1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Ruxolitinib (INCB018424)質(zhì)量規(guī)格:>99%Ruxolitinib (INCB018424)
人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLMK-1775,MK1775 質(zhì)量規(guī)格:>98%,Wee1激酶抑制劑MK-1775
M1細(xì)胞,小鼠細(xì)胞 脆弱擬桿菌 新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;NBTF槲皮素-7-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside
小鼠原B細(xì)胞株;BaF3鏈脲佐菌素100克
TNFSF13B Others Human 人 BAFF / TNFSF13B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 6-氧基 6-Mqthoxyinoneolinq;Mqthyl-6-inoneolyl qtqr 263-87-6
tTA基因修飾的小鼠細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3AGAROSEI/TBEBLEND1.5%瓊脂糖 - TBE 混合物 1.5%生物技術(shù)級(jí)100GRT
CPB2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 乳酸過氧化物酶shēng huà shì jì容量:1克*5
BT474 人導(dǎo)管癌細(xì)胞Polypeptone 250g/1kg 國產(chǎn)
單端孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 緩激肽Bradykinin質(zhì)量規(guī)格:>98%
小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1D 13223 (氟吡汀代謝產(chǎn)物)D 13223 (Flupirtine Metabolite)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
973細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠成骨細(xì)胞系,MC3T3-E1細(xì)胞 CL-0138Lec1(倉鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2伊潘立酮-d3Iloperidone-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
THP-1(人髓系單核細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2亞胺培南一水合物Imipenem Monohydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
NHDF-c adult 正常人皮膚成纖維細(xì)胞(NHDF)來自成年捐獻(xiàn)者 500,000cells 成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)5-羥基吲達(dá)帕胺5-Hydroxy Indapamide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。