產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63259 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
病毒N9亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63259 |
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
十六烷基-二甲基-乙基-溴化銨 50g 3-O-Methyl-3-methoxymaxterone 92282-70-7 中文名:3-O-甲基-3-甲氧基-5α-雄烷二醇 分子式:C21H36O3 度:98.0%
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生長調(diào)節(jié)致癌基因a 英文名稱: growth-regulated oncogene a 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GRO a
3-O-Acetylandrostenone hydrazone
122914-94-7 中文名:3-O-乙?;弁?span> 分子式:C21H32N2O2 度:98.0%
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for GC,>99%(GC))質(zhì)量規(guī)格:Standard for
GC,>99%(GC)Tetradecane
病毒N9亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-11酸三丁酯(standard for GC,>99.5%)質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,>99.5%Tributyl phosphate
ACO2 Others Mouse 小鼠 ACO2 / Aconitase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 熒光桃紅B,酸性紅92質(zhì)量規(guī)格:ARPhloxine B
CL-0017A673(橫紋肌瘤細胞)5×106cells/瓶×2依萊鉻紅B質(zhì)量規(guī)格:AREriochrome Red B
QBC-939, 細胞 (瘤株),Ke-3細胞 HL-60(急性粒細胞細胞)固紅RL質(zhì)量規(guī)格:>90%,BRFast
Red RL Salt
BE(2)-M17(神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;PA317氯羥喹(標準品)Clioquinol質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測定
*成纖維細胞HCF硫酸沙丁胺醇(標準品)Albuterol sulfate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸普拉鈉(標準品)Dehydroepiandrosterone-3-sulfate質(zhì)量規(guī)格:含量測定
大鼠腸內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL撲米酮(標準品)Primidone質(zhì)量規(guī)格:檢查
SUP-B15Ph+急淋細胞系 SUP-B15
acute lymphoblastic leukemia cell line Ph+ IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS葡萄糖酸鋅(標準品)Zinc gluconate質(zhì)量規(guī)格:檢查
Tenacigenoside A
中文名: 分子式:C35H56O12 度:% 兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Daturataturin A aglycone 中文名: 分子式:C28H38O5 度:93.0% 兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one 中文名: 分子式:C29H46O2 度:% 兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Oleandrin 中文名: 分子式:C32H48O9 度:98.0% 兔內(nèi)皮素(Endothelin-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
β-Anhydrouzarigenin 中文名: 分子式:C23H32O3 度:97.0% 兔內(nèi)皮抑素(rabbit ES) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝