產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7331 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:火雞出血性毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Turkey Hemorrhagic Enteritis Virus(TuHEV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
火雞出血性毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
KLE(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2紡錘菌素二鹽酸shēng huà shì jì容量:100克
Promocell C-28010 Mesenchymal Stem CellGrowth Medium, 間充質(zhì)干細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml偶氮二異丁晴(陰涼)(*) 2,2'-czobis(2-mqthylpropionitnilq)
人氣管平滑肌細(xì)胞總RNAHTSMC NA瓊脂糖蛋白Ashēng huà shì jì容量:RT1克
PGLYRP1 Others Mouse 小鼠 PGLYRP / TNFSF3L 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大孔吸附樹脂D101shēng huà shì jì容量:5克
HT1080 人成細(xì)胞,3-二基聯(lián)本胺鹽酸鹽3,3',4,4'-Bipxenyltetramine tetraxy7nochloride
TE 115.T細(xì)胞,人軟組織細(xì)胞 SV40永生化的人胚腎上皮細(xì)胞,293T細(xì)胞 腎小球內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)異鼠李素-3-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isorhamnetin-3-O-β-D-Glucoside
羊源細(xì)胞異鼠李素-3-O-新橙皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside
SFRP2 Others Mouse 小鼠 sFRP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異土木香內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isoalantolactone
CL-0063CNE(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2異烏藥內(nèi)酯/異烏藥內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isolinderalactone
ST6GALNAC2 Others Mouse 小鼠 STHM / ST6GALNAC2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異綠原酸C(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isochlorogenic acid C
EAC(小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0238U-87 MG(人神經(jīng)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA6-KT激動(dòng)素1克USP級,95%
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa2-基-1H-咪坐 2-Mqthylimidczolq 693-98-1
FIGF Others Rat 大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-metxoxybenzoicacid間甲氧基本酸25克超,99%
脂肪間質(zhì)干細(xì)胞 Adult adipose derived mesenchymal stem cells碳酸shēng huà shì jì容量:100克
SW038-C2細(xì)胞,人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 致病性大腸埃希氏菌 人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μgPlateCountAgar 100g原裝/500g原裝 BD 247930
火雞出血性毒探針法熒光定量PCR試劑盒小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H 10T1/2 2A62-[2-(2-t-Boc-氨基乙氧基)乙氧基]乙醇2-[2-(2-t-Boc-aminoethoxy)ethoxy]ethanol 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口原裝
95-C細(xì)胞,人低轉(zhuǎn)移細(xì)胞 大鼠腎小管上皮細(xì)胞,NRK細(xì)胞 CL-0154MDCK(犬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×22'-脫氧-2',2'-二氟尿嘧啶核苷2’,2’-Difluoro-2’-deoxyuridine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口原裝,97%
TSCCa(人舌鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2BMS 582664Brivanib alaninate質(zhì)量規(guī)格:>97%
HCF-c 人類的成纖維細(xì)胞(HCF) 500,000cells 神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)龍膽二糖Gentiobiose質(zhì)量規(guī)格:>96%,原裝進(jìn)口
腦內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)西洛多辛Silodosin質(zhì)量規(guī)格:>98%