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實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

兔阿霉素(ADR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate  中文名：  分子式：C22H25N3O2 

兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5-Aminoindole  中文名：5-氨基吲哚  分子式：C8H8N2 

兔S100b   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     4-Aminosalicylic acid  中文名：4-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3 

兔S100A6蛋白   英文名稱：   Rabbit S100 Calcium-binding Protein A6   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   S100A6  4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone  4551-69-3  中文名：4-苯甲?；?span>-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮  分子式：C17H14N2O2  度：98.0%   

兔P-選擇素(rabbit P-selectin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  116856-18-9  中文名：  分子式：C7H9N3O3
DH82 狗腎惡性癥細(xì)胞順式-5,8,11,14,17-二十碳五1酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaenoic acid

KLK4 Others Human  KLK-4 / Kallikrein-4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Celite 硅藻土 545(助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒)質(zhì)量規(guī)格：助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒Celite 545

SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞;hFOB 1.19十五氟辛酸(約5mmol)[離子對色譜級]質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑IPC-PFFA-8 (ca. 5mmol)

TH Others Mouse 小鼠 TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十五氟辛酸,高等級[離子對色譜級]質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑IPC-PFFA-8 HG

CM-H038直平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL9,10-二甲氧基蒽-2-磺酸鈉鹽[離子對色譜級]質(zhì)量規(guī)格：用于氨類的熒光離子對試劑IPA-DAS
CCL17 Protein Mouse 重組小鼠 CCL17 / TARC 蛋白甲鈷胺Mecobalamin質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

RL95-2(內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2  CGB5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 右旋酮洛芬氨丁三醇(S)-Ketoprofen trometamol質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M IE8右旋酮洛芬氨丁三醇(標(biāo)準(zhǔn)品)(S)-Ketoprofen trometamol質(zhì)量規(guī)格：含量測定

CDH1 Others Human  E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 植物凝膠(Sigma)Phytagel質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分;SigmaP8169

CM-R050大鼠卵巢顆粒細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL右旋酮洛芬(S)-(+)-Ketoprofen質(zhì)量規(guī)格：>98.5%
4,9-Dihydroxy-α-lapachone  中文名：  分子式：C15H14O5  度：98.0%  兔中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(rabbit NE)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Isodiospyrin  中文名：  分子式：C22H14O6  度：97.5%  兔神經(jīng)生長因子(rabbit NGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Ethyl (1-hydroxy-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-yl)acetate  中文名：  分子式：C10H12O4  度：%  兔神經(jīng)營養(yǎng)素3(rabbit -3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

16-Acetoxy-7-O-acetylhorminone  中文名：  分子式：C24H32O7  度：98.0%  兔骨鈣素(rabbit Osteocalcin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

腺病毒PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）α-Tocopherolquinone  中文名：  分子式：C29H50O3  度：98.0%  兔脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit A-FABP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。