產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7378 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱(chēng):性大腸埃希氏菌五重探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱(chēng):
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
性大腸埃希氏菌五重探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;MuM-2B血清兔抗BSA10克RT
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酰輔酶A 內(nèi)鹽 ≥93% (HPLC) (-20℃) ccqtyl coqnzymq c wo7ium sclt 1009-73-
MDA-MB-436 人腺癌細(xì)胞葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-50 Fine 9048-71-9 100G 分離試劑
NCI-H358人非小細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSwo7iumGluconate葡萄糖酸鈉*白色至微黃色精細(xì)結(jié)晶RTsigma
KITLG Protein Human 重組人 SCF / C-kit ligand 蛋白 (aa 1-189, His 標(biāo)簽)(甘油)
RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(人單核細(xì)胞)梓醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Catalpol
CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)5×106cells/瓶×2紫草素,左旋紫草素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Shikonin
RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 紫草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Lithospermic acid
人內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HLECL紫丁香酚苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Syringin
A2780/Taxol細(xì)胞,人紫杉醇耐藥株 鼠腹水單核細(xì)胞瘤,J774A.1細(xì)胞 組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml竹節(jié)參皂苷IVa(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:供含量測(cè)定用chikusetsu saponin Iva
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞錄化亞銻,英文名或英文縮寫(xiě):Antimony(III)chloride,級(jí)別:CP,規(guī)格:10克
ENPP2 Others Human 人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氧化鎢銨 Ammonium metatungstate hydrate,≥99.0% 174501-64-5 25G 通用試劑
大鼠嗅鞘細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1醋 ≥99%(2-8℃) LIGNOCqRIC cCID 227-29-2
DH82狗腎惡性癥細(xì)胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS曙紅Y(水溶)shēng huà shì jì容量:100克
IFNA5 Protein Human 重組人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)9025-35-8α-半乳糖苷酶(+4℃)EC 3.2.1.22
性大腸埃希氏菌五重探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒P3X63Ag8.653細(xì)胞,細(xì)胞 耐長(zhǎng)春新堿細(xì)胞系,HCT-8/VCR細(xì)胞 CM-H028人內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-Boc-N-去甲伊馬替尼N-Boc-N-Desmethyl Imatinib質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK伊立替康標(biāo)記物d10Irinotecan Labeled d10質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
REG3A Others Mouse 小鼠 REG3A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6-O-甲基-d3-鳥(niǎo)嘌呤6-O-Methyl-d3-guanine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
口腔角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OKMN7-(2-氨基甲酰-2-羥乙基)鳥(niǎo)嘌呤N7-(2-Carbamoyl-2-hydroxyethyl)guanine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2-氨基-6,8-二羥基嘌呤鹽酸鹽2-Amino-6,8-dihydroxypurine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口