產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7417 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:牦牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
牦牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
CSNK1G2 Others Human 人 CSNK1G2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-酰-L-谷酰,英文名或英文縮寫:Alu-Gln,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:5克
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184三溴新務(wù)醇 3-Bromo-2,2-bis(bromomqthyl)propcnol 2012/9/2
BHK細(xì)胞,幼倉鼠腎細(xì)胞 人細(xì)胞,CFPAC-1細(xì)胞 CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLGLYCEROLGELLOADINGDYE,5X5X核酸電泳上樣緩沖液,30%甘油超級(jí)暗紫色微粘稠液體COLDsigma
大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J5′-CTP,3Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸三鈉鹽500UBR,95%
RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 109-43-3癸二酸二丁酯Dibutyl Sebacate (AS)
PECAM1 Others Mouse 小鼠 PECAM1 / CD31 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 蘆薈大黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Aloeemodin
微內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHCMEC cDNA細(xì)胞色素C(馬源)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源馬心Cytochrome C
SLPI Others Human 人 SLPI 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 細(xì)胞色素C(牛源)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源牛心Cytochrome C
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6細(xì)胞色素C(豬源)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源豬心Cytochrome C
95-D細(xì)胞,高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 人細(xì)胞,M2e細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK盧立康唑質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRLuliconazole
HCCC-9810細(xì)胞,人膽管細(xì)胞型細(xì)胞 小鼠細(xì)胞G-CSF依賴性,NFS-60細(xì)胞 水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)GENE-PAGEPLUS5%,WITHTTEBUFFER 5% GENE-PAGE PLUS 含TTE生物技術(shù)級(jí)COLDsigma
MDBK(牛腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2黃蓍樹膠粉 Gum tragacanth powder 9000-65-1 100G 通用試劑
Promocell C-22170 Myocyte GrowthMedium KIT, 心肌細(xì)胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml單唾液神經(jīng)節(jié)苷酯(-20℃) GcNGLIOSIDq GM1, cMMONIUM ScLT, BOVINq 37728-47-7
kasumi-1, 人細(xì)胞株Atr莠去津5克超,100mM
ART4 Others Mouse 小鼠 Art4 / CD297 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 32449-92-6D-葡糖醛酸內(nèi)酯D-Glucurone
牦牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒家豬皮膚細(xì)胞;SSC-S14-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(含氮量:23.50-24.30 %)4-Phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione質(zhì)量規(guī)格:含氮量:23.50-24.30 %
IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))N-tert-Butyl-α-phenylnitrone質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
HT-29 人細(xì)胞4-羥基氨苯蝶啶4-Hydroxy Triamterene質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
U-118 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-118 MG of brain asocytic blastoma DMEM培養(yǎng)基+10%FBS4-羥基氨苯蝶啶硫酸鈉鹽4-Hydroxy Triamterene Sulfate, Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
VEGFA Protein Rat 重組大鼠 VEGF164 / VEGFA 蛋白2,4-二氨基-6-苯基-7-蝶啶2,4-Diamino-6-phenyl-7-pteridinol質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。