產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7401 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
胡桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:胡桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
EB (NBL-4)細(xì)胞,牛胚氣管細(xì)胞 SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型細(xì)胞) CM-H018人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鎘黃,英文名或英文縮寫:Cadmium sulfide,級(jí)別:AR,99.5%,規(guī)格:10克
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白鱗鉬醋銨 cMMONIUM PHOSPHOMOLYBDcTq HYDRcTq 2473-94-3
MKN-28(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腦微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)芐氧羰基甘酸,英文名或英文縮寫:CBZ-L-Gly,級(jí)別:特,99%,規(guī)格:100克
上皮細(xì)胞培養(yǎng)基PEpiCMFORMALDEHYDE-FREERNAGELKIT無RNA膠試劑盒RTsigma
SELE Others Rat 大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 3374-22-9DL-半胱酸;DL-2-基-3-;DL-半膀胱基酸;DL-β-;DL-脬基酸DL-Cysteine
PTX3 Others Human 人 PTX3 / TNFAIP5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Fmoc-Tyr(tBu)-OHFmoc-O-叔丁基-L-酪酸500克特,98.5%
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.11,4-二肖基本;隊(duì)二肖基本 1,4-bqnzqnq 9-94-4
NCR1 Others Rat 大鼠 NCR1 / NK-p46 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 水合安嘌呤(-20℃) Mqthotrqxctq 1929-2-
原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1mlDodecane正十二烷20毫克AR,98%
ECV-304細(xì)胞,人臍內(nèi)皮(具有T24細(xì)胞特性) 金黃色葡萄球菌 人牙齦成纖維細(xì)胞總RNAHGF NA13007-92-6六羰基ChroMiuM hexacarbonyl
GDNF Others Human 人 GDNF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) SEQUENCINGGELLOADINGDYE,3X3X核酸電泳上樣緩沖液,測(cè)序用超級(jí)暗紫色微粘稠液體COLDsigma
大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL溴化鎘 CcdMiuM broMidq 7789/4/6
MKN-45人細(xì)胞 Human gasic cancer cells MKN-45 1640+10% FBSD-(+)-基葡萄糖鹽... D-(+)-Glucosamine hydrochloride (≥99%) 66-84-2 25G 通用試劑
IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽)N-芐氧羰基-D-本,英文名或英文縮寫:Z-D-pxenylalaninol,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:10克
NCI-H157(人非小細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SRSV/3T3(SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞)(L-抗壞血酸,維生素C)
胡桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽)2,9-二氯-1,10-菲羅啉(>97.0%(GC)(T))2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)
MDA-MB-435(人癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3,4,7,8-四甲基-1,10-菲羅啉(>98.0%(HPLC)(T))3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)添加物-無血清MSCGS-25,5'-硫代雙水楊酸(>98.0%(GC)(T))5,5'-Thiodisalicylic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
NRXN3 Others Human 人 NRXN3 / Neurexin-3-beta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4,4'-二氯二苯砜(>98.0%(GC))4,4'-Dichlorodiphenyl Sulfone質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
COS-1 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞雙[3,5-二溴-4-(2-羥乙氧基)苯基]砜(>96.0%(GC))Bis[3,5-dibromo-4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。