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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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產(chǎn)氣莢膜梭菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P63515
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-06-24
  • 更新日期: 2024-11-26
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P63515
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

產(chǎn)氣莢膜梭菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63515

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,32。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

細菌乙醇脫氫酶總活性比色法定量檢測試劑盒20  2-Amino-3-Formylchromone  中文名:2-氨基-3-甲?;?span>  分子式:C10H7NO3  度:98.0%

細菌乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量檢測試劑盒20  2-Amino-4-chlorobenzothiazole  中文名:2-氨基-4-氯苯并噻唑  分子式:C7H5ClN2S  度:98.0%

細菌乙醇比色法定量檢測試劑盒20  2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole  2349-67-9  中文名:2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑  分子式:C2H3N3S2  度:98.0%   

細菌樣品二維電泳裂解液用于細菌蛋白二維電泳  2-Amino-6-chloropurine  中文名:2-氨基-6-氯嘌呤  分子式:C5H4ClN5  度:98.0%

細菌樣品二維電泳裂解液用于細菌蛋白二維電泳  2-Amino-6-chlorobenzothiazole  95-24-9  中文名:2-氨基-6-氯苯并噻唑  分子式:C7H5ClN2S  度:99.0%  關鍵詞:
TNFSF15 Others Rat 大鼠 TNFSF15 / TL1A 細胞裂解液 (陽性對照) 貝那普利拉/苯那普利拉(標準品)Benazeprilat質量規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗用

*微內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL奧美拉唑硫化物Omeprazole Sulfide質量規(guī)格:美國進口

MLTC-1細胞,小鼠間質細胞瘤細胞 KG-1(細胞) 惡性色素瘤細胞;A-375 [A375]6-羥基氯唑沙宗6-Hydroxy Chlorzoxazone質量規(guī)格:美國進口

CX3CL1 Protein Human 重組 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (His 標簽)6-嘌呤6-Mercaptopurine質量規(guī)格:美國進口

SV-HUC-1(膀胱上皮永生化細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 7-甲基-6-嘌呤7-Methyl-6-Mercaptopurine質量規(guī)格:美國進口
FCER2 Others Rat 大鼠 CD23 / FCER2 / FCER2A 細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸米諾環(huán)素(標準品)Minocycline 質量規(guī)格:>98%,BR

中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24鹽酸米托蒽醌(進分)Mitoxantrone HCl質量規(guī)格:進分sigma M6545

HLF-02細胞,胚肺二倍體細胞 大鼠肝星形細胞,CFSC-3H & 5H細胞 CM-M120小鼠角膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸米托蒽醌Mitoxantrone HCl質量規(guī)格:>98%,USP,可用于細胞培養(yǎng)

SK-Hep-1(細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸米托蒽醌(標準品)Mitoxantrone HCl質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

HUVEC-c pooled 混合來源的臍內(nèi)皮細胞(HUVEC) 500,000cells 腸粘膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)咪唑立賓Mizoribine質量規(guī)格:>98%,細胞培養(yǎng)級
(1S,2S)-1-Amino-2-Indanol  中文名:(1S,2S)-1-氨基-2-茚醇  分子式:C9H11NO  度:98.0%  小鼠細胞趨化因子 (mouse Lymphotactin)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   原裝進口

Azithromycin dihydrate  中文名:阿奇霉素二水物  分子式:C38H72N2O12  度:98.0%  小鼠單核細胞趨化蛋白 -1 (mouse MCP-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   奧地利 Bender  

8-Azaguanine  中文名:8-氮雜鳥嘌呤  分子式:C4H4N6O  度:98.0%  小鼠白介素 -12 (mouse IL-12)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 Biosource

產(chǎn)氣莢膜梭菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)2,2'-Anhydro-5-methyluridine  中文名:2,2'-O-脫水-5-甲基尿嘧啶核苷  分子式:C10H12N2O5  度:98.0%  小鼠白介素 -12(p40) (mouse IL-12 p40)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D

6-Benzyloxyindole  中文名:6-芐氧基吲哚  分子式:C15H13NO  度:98.0%  小鼠白介素 -12(p70) (mouse IL-12 p70)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   奧地利 Bender

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

 

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