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公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

10. 尿道細(xì)胞系統(tǒng)S-乙?；虼憠A(>99%,醫(yī)藥級)質(zhì)量規(guī)格：>99%,醫(yī)藥級S-Acetylthiocholine iodide

CL-0171NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N-丁二酸,S-乙?；叶减?span>(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRS-Acetylthioglycolic acid N-hydroxysuccinimide ester

人癌細(xì)胞;MDA-MB-468 大鼠小腦顆粒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL水楊醇(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSalicyl alcohol

Pcc4 小鼠SB3-18質(zhì)量規(guī)格：BRSB3-18

SIRPG Others Human 人 SIRPG / CD172g 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 魯斯考皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Ruscogenin
KYSE150 食管鱗癌西米替?。?biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cimetidine

ME-180頸表皮癌細(xì)胞 ME-180 human cervical epidermoid carcinoma cells McCOY's 5A+10%FBS阿德福韋/阿德福韋酯質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Adefovir dipivoxil

HGF Protein Rat 重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白吲哚菁綠質(zhì)量規(guī)格：>94%,BSIndocyanine Green

小鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞(MA-h)(5×105) kasumi-1, 細(xì)胞株 Human靛藍(lán)質(zhì)量規(guī)格：BSIndigotin

大鼠腎小管上皮細(xì)胞RRTEpiC甲基藍(lán)質(zhì)量規(guī)格：ARMethyl blue
豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1綠麥隆標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)Chlortoluron solution質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4%

AsPc-1細(xì)胞，轉(zhuǎn)移*癌細(xì)胞 正常皮膚細(xì)胞,HaCaT細(xì)胞 小鼠T細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9敵草隆(99%)Diuron質(zhì)量規(guī)格：0.99

HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2四螨嗪(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6%)Clofentezine質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6%

Gibco 17101015 Collagenase Type II 1g非草隆(標(biāo)準(zhǔn)品)Fenuron質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

心肌細(xì)胞-心室cDNAHCF-av cDNA丁(B9)(標(biāo)準(zhǔn)品)Daminozide質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
NCI-H446[H446]細(xì)胞，小細(xì)胞細(xì)胞 人癌細(xì)胞系,ZR-75-30細(xì)胞 615小鼠T細(xì)胞性瘤株;L7712鹽酸-Na-本甲酰-L-精酸乙酯，英文名或英文縮寫：BAEE，級別：BR，98%，規(guī)格：10克

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)3-(三基硅基)溴炳決 3-BROMO-1-(TRIMqTHYLSILYL)-1-PROPYNq 3800-42-8

IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ETHANOLANxy7noUS,DENATURED1試劑級透明液體RT不sigma

人骨骼肌成肌細(xì)胞裂解物HSkMMLN-芴甲氧羰基-D-天冬酰，英文名或英文縮寫：Fmoc-D-Asn-OH，級別：特，98%，規(guī)格：100克

細(xì)小病毒B19探針法熒光定量PCR試劑盒VTCN1 Others Human 人 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酸test111