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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BK-P64722 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
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豬托克特諾病毒1型（豬細環(huán)病毒1型）染料法熒光定量PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64722 |
實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
CL-0152MDA-MB-453(人癌細胞)5×106cells/瓶×2二250克RT，避光
F10 Others Human 人 Coagulation Factor X / FX / F10 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2-本基-5(4-聯(lián)本基)-1.3.4-惡二坐 2-(4-tqrt-Butylphqnyl)-5-(4-biphqnyl)-1,3,4-oxcdiczolq1208-8-7
人滑膜細胞裂解物HSL嶙酸10克
NCI-H838[H838]細胞，人細胞 人,A2細胞 腦內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)L-天冬酸鉀，英文名或英文縮寫：potewwium L-Aspartate，級別：BR，98%，規(guī)格：10克
兔角膜后基質(zhì)層成纖維細胞;RCBBF55-99-4扶1酸二異丙酯(劇毒)7iiwopnopyl
fluonopxowpxete
CM-H088腹膜內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL植酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPhytic acid dodeca salt hydrate
BALB/C小鼠肝上皮細胞;BNL 1ME A.7R.1 小鼠小腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL菊粉;菊糖質(zhì)量規(guī)格：>90%,BRInulin from chicory
RSC, 大鼠雪旺細胞 Rattus固深紅 GBC質(zhì)量規(guī)格：BS,90%Fast Garnet GBC Salt
EPHB4 Others Mouse 小鼠 EPHB4 / HTK 細胞裂解液 (陽性對照) 固紅 3 GL質(zhì)量規(guī)格：BSFast Red 3 GL Salt
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞;HH-29固紅 KL鹽質(zhì)量規(guī)格：BSFast
Red KL Salt
新生兒細胞完全培養(yǎng)基 100mL二十五烷(>99.0%(GC)，標準物質(zhì))Pentacosane質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)，標準物質(zhì)
CFSC-8B細胞，大鼠肝星形細胞 L-02(正常肝細胞) tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3E5正辛酸甲酯(>99.5%(GC),標準物質(zhì))Methyl n-Octanoate質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標準物質(zhì)
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (Fc 標簽)壬酸甲酯(>99.5%(GC),標準物質(zhì))Methyl Nonanoate 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標準物質(zhì)
WISH(羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3甲酯(>99.5%(GC),標準物質(zhì))Methyl Laurate 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標準物質(zhì)
周細胞裂解物HBVCL肉豆蔻酸甲酯(>99.5%(GC),標準物質(zhì))Methyl Myristate質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標準物質(zhì)
RM-1細胞，小鼠細胞 LoVo(細胞) 人結(jié)直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]伐地那非三水合鹽酸鹽Vardenafil trihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,三水合物
CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 標簽)伐地那非三水合鹽酸鹽(標準品)Vardenafil trihydrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
SW480(人細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 抑氨肽酶,烏苯美司,貝他定，苯丁抑制素Bestatin,Ubenimex質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
人尿道上皮細胞cDNAHUC cDNA抑氨肽酶(進口)Bestatin,Ubenimex質(zhì)量規(guī)格：>99%,美國進口sc-202975
IL21R Others Cynomolgus 食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 高藜蘆酸(標準品)(3,4-Dimethoxyphenyl)acetic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
豬托克特諾病毒1型（豬細環(huán)病毒1型）染料法熒光定量PCR試劑盒主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
