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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BK-P64466 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 2μg |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
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質(zhì)粒PET32a |
2μg |
BK-P64466 |
實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
胰蛋白酶抑制劑 10g Polyphyllin D 50773-41-6 中文名：重樓皂苷D 分子式：C44H70O16 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
胰蛋白酶檢測 Alkaline phosphatase (AKP) detection Polypodine B 中文名：水龍骨甾酮B 分子式：C27H44O8 度：97.5%
胰蛋白酶測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 Tetracaine 136-47-0 中文名：鹽酸丁卡因 分子式：C15H25ClN2O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
胰蛋白酶測定試劑盒（紫外比色法） Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt 153012-37-4 中文名： 分子式：C28H42N6O8S2
胰蛋白酶1:250
250g Polyphyllin D 中文名：重樓皂苷D 分子式：C44H70O16 度：98.0%
FCGR3A Others Human CD16a / FCGR3A 細胞裂解液 (陽性對照) 氟啶酮(>98%,植物激素級)質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物激素級Fluridone
大鼠腦細胞;C6組胺(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCHistamine
REG3A Others Rat 大鼠 REG3A 細胞裂解液 (陽性對照) 胰酶(1:4500)質(zhì)量規(guī)格：酶活1:4500,BRPancreatin
上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君質(zhì)量規(guī)格：>98%,BROrphenadrine
TSCCA細胞，舌鱗癌細胞系 乙型副傷寒沙門氏菌 化大家鼠;NRmβ-半乳糖苷酶質(zhì)量規(guī)格：700u/mg，羅氏分裝β-Galactosidase
成細胞;Saos-2 脈絡(luò)膜微細胞完全培養(yǎng)基 100mL龍膽苦苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Gentiopicroside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
小腦星形膠質(zhì)細胞cDNAHA-c cDNA蘆薈苷AAloin質(zhì)量規(guī)格：>85%,BR
DLL1 Others Rat 大鼠 DLL1 / Delta-like 細胞裂解液 (陽性對照) 蘆薈苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Aloin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠Lewis瘤株;LLT蘆薈寧（標(biāo)準(zhǔn)品）Aloenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6 II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL蘆竹堿Gramine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
Atractylodin
中文名：蒼術(shù)素 分子式：C13H10O 紅細胞NADH高鐵血紅蛋白還原酶測定試劑盒（比色法）
Atorvastatin calcium 中文名：阿托伐他汀鈣 分子式：C33H35FN2O5 銅－ATP酶（Cu-ATPase）測定試劑盒（比色法）
Aspirin 中文名：阿司匹林 分子式：C9H8O4 總谷胱甘肽（T-GSH）/氧化型谷胱甘肽（GSSG）測定試劑盒（微板法）
Aspergillon A 中文名： 分子式：C22H32O 酸性0酸酶（ACP）測定試劑盒（微板法）
Aspartame 中文名：阿司帕坦 分子式：C14H18N2O5 抗酸性0酸酶（SACP）試劑盒（比色法）
質(zhì)粒PET32a本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
