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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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病毒通用RT-PCR試劑盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BK-P64577
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-06
  • 更新日期: 2024-11-26
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-P64577
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

病毒通用RT-PCR試劑盒

50

BK-P64577

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,32。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

豬細(xì)胞間粘附分子1elisa試劑盒   豬細(xì)胞間粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T     Shikonin  中文名:紫草素  分子式:C16H16O5  度:99.0%

豬病毒IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒   48T/96T   試劑盒   組裝/原裝           Shikimic acid  138-59-0  中文名:莽草酸  分子式:C7H10O5 

豬病毒(HEV)*試劑盒(-PCR)   48T  Shiraiachrome A  中文名:  分子式:C30H26O10  度:%

病毒抗體elisa試劑盒   病毒抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T     Shikonin  中文名:紫草素  分子式:C16H16O5 

病毒(CSFV)*試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>)   48T                 Stigmasta-4,25-dien-3-one  848669-08-9  中文名:  分子式:C29H46O
草魚(yú)腎細(xì)胞;GIK順鉑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cisplatin

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 克拉曲濱,克拉利賓質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,USP34,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Cladribine

CL-0262BE(2)-M17(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2西地尼布馬來(lái)酸鹽質(zhì)量規(guī)格:度> 99%Cediranib Maleate

HCC細(xì)胞,高分化鱗癌細(xì)胞 T瘤細(xì)胞Jurkat亞系,Jurkat77細(xì)胞 癌細(xì)胞;MDA-MB-157西他列汀質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRSitagliptin

786-O(腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2維達(dá)列汀;維格列汀質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRVildagliptin
腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞RNAHRCEpiC miRNA5 μg拉莫三嗪 (標(biāo)準(zhǔn)品)Lamotrigine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

LILRA3 Others Human  ILT6 / LILRA3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D-半乳糖醛酸D-Galacturonic acid質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分,97%,一水

新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;NBTFD-半乳糖醛酸(標(biāo)準(zhǔn)品)D-Galacturonic acid質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定;一水物

HCT-15細(xì)胞,結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞,OCM-1細(xì)胞 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo骨化三醇Calcitriol質(zhì)量規(guī)格:度≥98%,BR

Hepa 1-6(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2坎地沙坦酯Candesartan cilexetil質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
Peri acid  中文名:周位酸  分子式:C10H9NO3S    人葡萄糖激酶(GCK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Perforatumone  中文名:  分子式:C35H52O5    人單胺氧化酶(MAO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Pentoxyverine   中文名:枸櫞酸噴托維林  分子式:C26H39NO10    中文名稱   方法   規(guī)格

Pentagalloylglucose  中文名:五沒(méi)食子酰葡萄糖  分子式:C41H32O26    人抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

病毒通用RT-PCR試劑盒Pemetrexed di  中文名:培美曲塞二鈉  分子式:C21H23N5Na2O6    人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

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