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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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NKM-1細胞
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:E0805
  • 價格: ¥2050/株
  • 發(fā)布日期: 2020-10-06
  • 更新日期: 2024-11-27
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 E0805
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 急性髓系白血病;男性
細胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 懸浮
物種來源
包裝規(guī)格 1×106
純度 詳見說明書%
是否進口

產(chǎn)品簡稱:NKM-1細胞
中文名稱:人細胞

規(guī)格:1×106

種屬:人

來源:急性髓系;男性

培養(yǎng)基:1640

狀態(tài):懸浮

單位:T25/

貨號:E0805

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

NKM-1細胞

1×106

E0805

帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等,更大就是反應器了。

帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細胞貼壁和生長。225ml 175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細胞實驗用(一般性的傳代,保存細胞,為實驗提供細胞等),25ml一般是用來復蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細胞復蘇
將凍存細胞從液氮中取出后,在37水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中,加入37oC預熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.
細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細胞狀態(tài)不佳,1:21:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:31:5細胞一代,即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細胞**消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度)進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80冰箱內(nèi)過夜。
*
天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。 
細胞凍存和復蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:

小鼠舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒              Methylprednisolone hemisuccinate  2921-57-5  中文名:  分子式:C26H34O8 

小鼠舒緩激肽(BK)ELISAKit     Doxapram hydrochloride monohydrate  7081-53-0  中文名:鹽酸多沙普侖  分子式:C24H33ClN2O3  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

小鼠生成素樣蛋白4   英文名稱:   Mouse Angiopoietin Like Protein 4   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   ANGPTL4  D-Pinitol  10284-63-6  中文名:D-松醇  分子式:C7H14O6 

小鼠生成素樣蛋白2   英文名稱:   Mouse Angiopoietin like protein 2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   ANGPTL2  D-Pinitol  10284-63-6  中文名:D-松醇  分子式:C7H14O6  度:98.0%  關(guān)鍵詞:  降糖; 棉鈴蟲幼蟲生長抑制劑; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

小鼠生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒     Methyl levulinate  中文名:  分子式:  度:%
D(
)無水葡萄糖 HPLC98% 100mg 10%Formalin固著液50毫升

DA HPLC98% 20mg MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISA試劑盒小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Dapagliflozin HPLC98% 20mg 小鼠血小板衍生生長因子B(PDGFB)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGFB ELISA Kit

DHApaclitaxel HPLC98% 20mg 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA檢測試劑盒rabbitmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 96T/48T

DL薄荷醇 GC98% 20mg 犬白介素6(IL-6)試劑盒 Dog Ierleukin 6,IL-6 ELISA Kit

DL蛋氨酸(甲硫氨酸) HPLC98% 200mg 英文名稱HumanFibroblastgrowthfactoracidicELISAKit人酸性成纖維細胞生長因子(FGF1)規(guī)格:96T/48T

DL丁香樹脂酚 HPLC98% 5mg 大鼠p16基因甲基化檢測試劑盒20

DL精氨酸 HPLC98% 200mg RatLeukoieneC4,LT-C4ELISA試劑盒大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

DRF HPLC98% 20mg 小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGF-AB ELISA Kit

D阿拉伯糖 HPLC99% 100mg 小鼠膀胱抗原(BTA)ELISA檢測試劑盒MouseBladdeumoraigen,BTAELISAKit 96T/48T
CL Others Human
CL-1 / CL / Chymoypsin-like protease 人細胞裂解液 (陽性對照) 菝葜皂苷元(標準品)Sarsasapogenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

615小鼠株;Ca759阿魏酸鈉 ferulic質(zhì)量規(guī)格:>99%

L-02細胞,正常人肝細胞 APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株,7WML6.0細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA阿魏酸鈉(標準品) ferulic質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%(干品),標準品

LLC(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2頭孢妥侖匹酯Cefditoren pivoxil質(zhì)量規(guī)格:>950μg/mg,BR

Promocell C-77110 Mitsuhashi/Maramorosh InsectMedium昆蟲細胞培養(yǎng)基 500ml頭孢妥侖匹酯(標準品)Cefditoren pivoxil質(zhì)量規(guī)格:效價測定
NKM-1
細胞人色素瘤細胞;A875蓖麻油酸甲酯(標準品)Methyl ricinoleate質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99%(GC)

IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人細胞裂解液 (陽性對照) 山崳酸甲酯(標準品)Methyl behenate質(zhì)量規(guī)格:分析標準品

人肝竇內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL二十四烷酸甲酯(標準品)Methyl tetracosanoate質(zhì)量規(guī)格:分析標準品

LLC細胞,小鼠細胞 CHO(中國倉鼠卵巢細胞) 恒河猴肺細胞;RM-L1芥酸甲酯(標準品) Methyl cis-13-docosenoate質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)

PPBP Protein Rat 重組大鼠 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標簽)十九酸(標準品)Nonadecanoic Acid質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.5% (GC)
注意事項:
NKM-1細胞1)預熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37水浴鍋內(nèi)預熱;
2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
4)點燃酒精燈:注意火焰不能太小;
5)嚴格的無菌操作;
6)貼壁細胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
7)傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染;
8)傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。

 


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